紫外分光光度计测维生素c论文

紫外分光光度计测维生素c论文

问:紫外分光光度法测定维生素C的含量
  1. 答:1 仪器与试剂
    UV-260紫外分光光度计,VitC对照品及VitC片(规格:50mg)均由河南某药厂提供,硫酸溶液(pH=6)。 2 实验操作
    2.1 标准曲线的绘制 精密称取VitC对照品0.05g溶于100ml硫酸溶液,再稀释成一系列不同浓度的对照品溶液(0~14μg/ml),分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线,可求出该曲线的斜率。
    2.2 样品测定 取VitC20片,精密称定,研细,精密称出适量(相当于VitC50mg),置于100ml量瓶中,加硫酸溶液溶解并稀释至刻度,滤过,精密量取续滤液2ml置于另一100ml量瓶中,加硫酸溶液稀释至刻度,测出其吸光度A 样 。由标准曲线查出样品的浓度C 样品[3] 。
    2.3 结果计算 根据精密称出的样品的质量、溶解及稀释的体积可求出C 样 。
    VitC含量=C 样品 /C 样 或VitC含量=A 样 /K×C 样
    注:K为标准曲线的斜率。
    3 讨论
    维生素C的还原能力强而易被氧化,特别是在碱性溶液中更易被氧化。另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。因此,选择硫酸溶液使成弱酸性。
    测定时溶液pH的选择:维生素C的紫外最大吸收波长与溶液的pH值有着密切关系。在pH=2.0时,溶液的最大吸收波长在245nm;在pH=12时,溶液的最大吸收波长在300nm;在pH=5~10范围时,溶液的最大吸收波长在267nm,况且在pH=6.0时吸收度值最大。所以,选择测定溶液的pH=6.0。
    本方法对仪器的要求不是很高,适用于大批量样品的定量分析。但是,若仪器搬动或重新校正波长、或者更换仪器时,标准曲线必须重新绘制。
问:紫外分光光度法怎么计算,维生素C 的含量
  1. 答:先用标准溶液做标定曲线,然后再测未知溶液的吸收,对应到曲线上就行了
问:紫外分光光度法测定维生素C时,为什么选择稀硫酸溶解维生素C
  1. 答:1 仪器与试剂
    UV-260紫外分光光度计,VitC对照品及VitC片(规格:50mg)均由河南某药厂提供,硫酸溶液(pH=6)。 2 实验操作
    2.1 标准曲线的绘制 精密称取VitC对照品0.05g溶于100ml硫酸溶液,再稀释成一系列不同浓度的对照品溶液(0~14μg/ml),分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线,可求出该曲线的斜率。
    2.2 样品测定 取VitC20片,精密称定,研细,精密称出适量(相当于VitC50mg),置于100ml量瓶中,加硫酸溶液溶解并稀释至刻度,滤过,精密量取续滤液2ml置于另一100ml量瓶中,加硫酸溶液稀释至刻度,测出其吸光度A 样 。由标准曲线查出样品的浓度C 样品[3] 。
    2.3 结果计算 根据精密称出的样品的质量、溶解及稀释的体积可求出C 样 。
    VitC含量=C 样品 /C 样 或VitC含量=A 样 /K×C 样
    注:K为标准曲线的斜率。
    3 讨论
    维生素C的还原能力强而易被氧化,特别是在碱性溶液中更易被氧化。另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。因此,选择硫酸溶液使成弱酸性。
    测定时溶液pH的选择:维生素C的紫外最大吸收波长与溶液的pH值有着密切关系。在pH=2.0时,溶液的最大吸收波长在245nm;在pH=12时,溶液的最大吸收波长在300nm;在pH=5~10范围时,溶液的最大吸收波长在267nm,况且在pH=6.0时吸收度值最大。所以,选择测定溶液的pH=6.0。
    本方法对仪器的要求不是很高,适用于大批量样品的定量分析。但是,若仪器搬动或重新校正波长、或者更换仪器时,标准曲线必须重新绘制。
紫外分光光度计测维生素c论文
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