术前肾动脉化疗栓塞在肾母细胞瘤患儿中的应用

一、术前肾动脉化疗及栓塞在儿童肾母细胞瘤的应用（论文文献综述）

周家华^[1]（2019）在《顺铂对肾母细胞瘤细胞株体外影响的初步研究》文中认为目的初步探讨不同浓度的顺铂（Cisplatin,DDP）,对肾母细胞瘤瘤株的抑制作用,为相关的动物实验提供前期工作和一定的理论依据。方法1.CCK-8法检测细胞增殖活力:在96孔板上培养两癌株（SK-NEP-1/G401）,按加入顺铂的量将癌株分为6组,于24,48,72h后加入CCK-8,测量其在450nm处的光密度（OD值）,并进行统计学分析2.划痕实验检测细胞迁移能力:在24孔板上培养两癌株,按加入顺铂的量将癌株分为6组,用枪头比着直尺垂直划线,于0,24,48h观察细胞的迁移情况,拍照细胞迁移情况,计算划痕愈合率%=（0 h划痕区域像素-24、48 h划痕区域像素）/0 h划痕区域像素x100%,并进行统计学分析3.蛋白质免疫印迹（WB）测BAX蛋白含量:按加入顺铂的量将癌株分为6组,提取总蛋白,再用Western blot技术检测各组内的Bax蛋白和β-Actin蛋白的含量,计算Bax蛋白相对量,并进行统计学分析结果1.在接种细胞后的第24,48,72h,未加入顺铂组（0%组）的SKNEP-1/G401细胞在A450处OD值明显高于加入顺铂组（0.1%,0.2%,0.4%,0.8%及1.6%组）（p<0.001）,顺铂对SK-NEP-1/G401的增殖能力的最大抑制浓度为0.2%0.4%。2.在接种细胞后的第0,24,48h,顺铂对SK-NEP-1/G401细胞在24h及48h的划痕愈合率具有明显差异（p<0.001）,顺铂对SK-NEP-1迁移能力的最大抑制浓度为0.2%0.4%。3.顺铂影响后Bax表达增加,0.2%组和0,4%组与对照组相比差异明显（p<0.001）,顺铂引起SK-NEP-1中Bax蛋白明显增加的浓度为0%0.2%;0.4%组与对照组相比差异明显（p<0.001）,0.2%组与0.4%组之间差异明显（p<0.001）,顺铂引起G401中Bax蛋白明显增加的浓度为0.2%0.4%.结论1.顺铂能够抑制肾母细胞瘤SK-NEP-1/G401瘤株增殖能力,顺铂对SK-NEP-1/G401的增殖能力的最大抑制浓度为0.2%0.4%。2.顺铂能够抑制肾母细胞瘤SK-NEP-1/G401瘤株迁移,顺铂对SKNEP-1迁移能力的最大抑制浓度为0.2%0.4%。3.顺铂能够促进Bax蛋白的表达,可能是诱导细胞凋亡和癌行为能力降低的原因;顺铂引起SK-NEP-1中Bax蛋白明显增加的浓度为0%0.2%,顺铂引起G401中Bax蛋白明显增加的浓度为0.2%0.4%。4.顺铂对肾母细胞瘤SK-NEP-1/G401瘤株的抑制作用存在平台期

贾绚,赖灿,潘海鹏,周海春,杨丽,费正华^[2]（2019）在《儿童中晚期肾母细胞瘤术前经肾动脉栓塞化疗的疗效对比评价》文中进行了进一步梳理目的 对比评价术前经肾动脉化疗栓塞（TACE）、经肾动脉灌注化疗（TAIC）和全身静脉化疗对儿童中晚期肾母细胞瘤的疗效及预后。方法 回顾性分析浙江大学医学院附属儿童医院2007年1月至2018年12月经手术及病理证实的60例肾母细胞瘤。以肾母细胞瘤患儿术前44例TACE组为研究组,以术前7例TAIC组和9例静脉化疗组为对照组,对比分析三组患儿治疗前后影像学检查、治疗安全性和远期疗效的差异。观察指标有肿瘤减积率、包膜完整率、坏死率、术后不良反应及随访情况。结果 TACE组、TAIC组、静脉化疗组比较,肿瘤减积率：TACE组肿瘤平均缩小46.5%,TAIC组肿瘤平均缩小28.3%,静脉化疗组肿瘤缩小23.3%,TACE组与静脉化疗组肿瘤减积率差异有统计学意义（P<0.05）。肿瘤坏死率：TACE组肿瘤均有不同程度坏死,坏死面积占46.0%～95.4%,平均75.1%±12.5%,高于静脉化疗组（65.8%±8.7%）,差异有统计学意义（P<0.01）。三组患儿肿瘤包膜完整率分别为86.4%（38/44）、5/7和6/9,TACE组与静脉化疗组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。三组患儿化疗后均行手术切除,无死亡病例。44例TACE组治疗后仅5例出现骨髓抑制,对比7例TAIC组治疗后出现4例骨髓抑制和9例静脉化疗组治疗后出现8例骨髓抑制,差异有统计学意义。TACE组随访时间20～92个月（中位时间64个月）,无瘤生存率95.0%；TAIC组随访时间12～69个月（中位时间30个月）,无瘤生存率43.0%；静脉化疗组随访时间16～72个月（中位时间28个月）,无瘤生存率56.0%。结论 术前TACE能使肿瘤缩小和坏死更明显,全身不良反应小,肿瘤完整切除率更高,手术也更安全,可有效提高生存率,更适用于临床诊疗。

张高峰,王盛兴,白明,张敬悌^[3]（2017）在《以肾脏外伤为首发症状的肾母细胞瘤（附5例报告并文献复习）》文中研究说明目的:探讨总结以肾脏外伤为首发症状的肾母细胞瘤的病例特点。方法:回顾分析5例以肾脏外伤为首发症状的肾母细胞瘤的病例。结果:5例以肾脏外伤为首发症状的肾母细胞瘤早期表现主要为腰腹部疼痛及贫血,随肿瘤出血程度不同临床表现严重性不同。结论:以肾脏外伤为首发症状的肾母细胞瘤诊断主要依靠查体、彩超、CT等,必要时肾动脉穿刺造影第一时间可提供诊断及治疗。术前肿块穿刺活检是确诊本病的金标准。该病治疗目前提倡综合治疗及个体化治疗方案。

鄂天娇^[4]（2016）在《儿童肾脏及肾上腺占位性病变的临床及CT研究》文中提出第一部分儿童肾脏肿瘤的临床及CT研究目的:探讨儿童肾脏肿瘤的CT与临床特征,旨在提高对该类疾病的术前诊断水平。材料与方法:回顾性分析我院121例经临床病理证实的儿童肾脏肿瘤的临床和CT资料,了解儿童肾脏肿瘤的病理类型、以及与此相关的发病年龄,探讨各类肾脏肿瘤的CT表现与临床表现有无相关性。结果:男73例,女48例,年龄1个月10岁,平均2.8±2.3岁,以腹部肿块、血尿、发热为主要症状。肾母细胞瘤95例,年龄5个月9岁,平均2.8±2岁。CT表现为肾内边界较清的混杂密度肿块伴较明显囊变坏死,28例伴钙化（28.9%）,10例伴肾静脉或下腔静脉内癌栓（10.5%）,10例发现肺或肝脏内转移灶。其中,8例Botroyid肾母细胞瘤,6例部分囊状分化的肾母细胞瘤,1例畸胎样肾母细胞瘤,1例伴肾源性残余。先天性中胚层肾瘤6例,均1岁以下,4例为胎内B超发现。CT表现与肾母相似但无钙化,无癌栓,无转移。横纹肌样瘤4例,平均3.5,为浅分叶形,密度混杂,坏死明显,无钙化,3例见包膜下积液,2例伴多发转移灶,1例发现静脉癌栓。透明细胞肉瘤8例,平均3.3岁,坏死较肾母更显着,2例伴远处转移,1例侵犯周围组织器官。婴儿骨化性肾肿瘤2例,年龄为4个月和6个月,均以血尿就诊,见肾盏内以钙化为主的较小肿块,1例中等强化,1例无强化。淋巴瘤肾脏浸润2例,双肾多发平扫稍高密度灶。肾透明细胞癌1例,年龄3岁。成熟性畸胎瘤1例,为多房囊性病变伴斑片样钙化及少许脂肪密度。囊性肾瘤1例。后肾腺瘤1例。以血尿为首发或主要伴随症状的共33例（27%,33/121）,肾母血尿发生率占27.4%,婴儿骨化性肾肿瘤100%,肾横纹肌样瘤50%,透明细胞肉瘤37.5%,研究血尿与肿块累及肾盂的关系,P=0.000<0.05,相关系数r=0.4516。结论:儿童肾脏肿瘤以肾母细胞瘤占绝大多数（95/121,78.5%）,3个月以内以中胚叶肾瘤为主。临床以无痛性腹部肿块和血尿为主要表现。血尿多见于Botroyid肾母细胞瘤、婴儿骨化性肾肿瘤和横纹肌样瘤,血尿的发生于肿瘤侵犯肾脏相关。透明细胞肉瘤、横纹肌样瘤首诊时可发生多处转移。儿童肾脏肿瘤CT及临床表现有很多相似之处,同时也有各自的特点,两者结合能够提高术前诊断水平。第二部分儿童肾上腺占位性病变的临床及CT研究目的:探讨儿童肾上腺占位性病变的CT及临床特征,旨在提高对儿童该部位占位性病变的认识及术前诊断水平。材料与方法:回顾性分析我院儿童肾上腺占位性病变126例,7例经临床确诊,其余均由病理证实。分析各类疾病的临床及CT特征,了解相应的临床及CT表现特征。结果:神经母细胞瘤91例,年龄15天8岁,以腹部包块、腹痛、发热为主要表现,其中2例为囊性神经母细胞瘤,18例有转移征象,2例胎内发现。CT为大小不一、分叶状肿块,见钙化（75.8%,69/91）。病灶包绕后腹膜大血管及其分支（46.2%,42/91）,静脉癌栓仅2例,15例侵犯临近脏器,31例伴转移。60例测血清NSE水平,平均361.9±387.8 ug/L;77例测血LDH,平均651±1297 U/L;75例测尿VMA,36例增高。节细胞神经瘤8例,5例腹痛,1例发热。肿块边界清,少见钙化（3/8）及坏死（1/8）。肾上腺皮质肿瘤8例,年龄2-8岁,临床表现有性早熟（100%,8/8）、库欣综合征（1/8）。1例皮质腺瘤边界清,密度均匀;7例皮质癌形态基本规则,密度不均匀,见坏死（7/7）及钙化（4/7）,增强后见瘤内迂曲供血血管影（6/7）。嗜铬细胞瘤4例,年龄5个月12岁,均有血压增高,伴头痛、腹痛。肿块边界较清,钙化1例,2例有坏死,增强后肿块周边强化明显。生殖细胞肿瘤8例,年龄2个月8岁,6例成熟性畸胎瘤,2例混合型生殖细胞瘤（HCG和AFP显着增高）。肾上腺血肿7例,年龄8天4个月,患儿多有病理性黄疸。CT示占位边界清,平扫低密度,内可见出血,环形强化,随访明显缩小。非神经母肾上腺占位与神经母细胞瘤的NSE值进行比较,P<0.05。分别比较神经母与非神经母恶性肿瘤、恶性肿瘤与良性肿瘤间LDH值,前者无统计学差异（p=0.827）,后者有统计学差异（P=0.000）。结论:儿童肾上腺占位性病变以神经母细胞瘤最多见,血清NSE升高有相对特异性,肿瘤的钙化、包绕血管生长具有特征性。肾上腺皮质癌儿童性早熟为突出表现,瘤体大,肿瘤坏死显着,常见新生血管、腔静脉内癌栓,有助于与神经母的鉴别。小婴儿肾上腺囊性神经母细胞瘤与肾上腺血肿影像学上难以鉴别,需结合临床资料及2-3周随访确诊。高血压是嗜铬细胞瘤的特征性临床表现,成熟性畸胎瘤有特征性的CT表现。AFP和HCG水平对生殖细胞肿瘤有鉴别意义。

孙志南,胡东来,黄益平,陈俊杰,金红来,徐胜,郭晓东^[5]（2016）在《术前经动脉化疗栓塞治疗婴儿肾母细胞瘤的疗效观察》文中研究说明目的探讨术前经动脉化疗栓塞治疗婴儿肾母细胞瘤的可行性。方法2009年6月至2014年5月收治6例婴儿单侧肾母细胞瘤,术前评估肿瘤手术一期切除困难,所有婴儿均行经导管肾动脉化疗栓塞,术后4周内行肿瘤根治性手术切除,记录并分析6例婴儿的治疗结果、并发症及随访结果。结果6例婴儿介入后肿瘤体积均缩小,平均缩小39.03%（23.95%61.8%）,介入治疗总有效率达83.33%（5/6）;手术中瘤体完整切除率为100%,无肿瘤破溃及污染腹腔情况。手术后随访时间平均为42.8个月,无肿瘤复发、远处转移及死亡。结论术前经动脉化疗栓塞治疗婴儿巨大肾母细胞瘤是安全、有效的,能为一期手术切除困难的肾母细胞瘤患儿提供一种新的治疗模式。

周晶,李春旺,定明艳,张小芳,刘一帆^[6]（2013）在《儿童肾母细胞瘤经动脉化疗栓塞术的护理》文中提出目的探讨提高儿童肾母细胞瘤经动脉化疗栓塞术成功率的护理模式。方法通过回顾性研究本院2012年收治的10例肾母细胞瘤患儿的住院期间的护理措施。结果 10例患儿化疗栓塞术均获成功,栓塞后有不同程度的发热、疼痛和恶心呕吐,经积极对症处理后好转,未出现严重并发症。栓塞后2周内行外科手术切除。结论术前术中术后良好的护理配合是经动脉化疗栓塞术成功的有力保证。

贾俊君^[7]（2012）在《术前化疗对儿童肾母细胞瘤疗效的Meta分析》文中研究说明目的：评估术前化疗对儿童肾母细胞瘤肿瘤缩小率、肿瘤全切率及术后无瘤生存率影响，为进一步提高临床治疗效果及研究水平提供参考。方法：根据制定好的检索策略，计算机检索PubMed，Cochrane（2011年第3期），OVID（包括EMbase和Biosis previews数据库），VIP，CNKI，Wang Fang Data，由2名评价员按纳入排除标准独立选择文献、提取数据并交叉核对，依据Cochrane handbook5.0.0推荐的4条随机对照试验质量评价标准评价纳入研究的方法学质量，并采用Stata11软件进行统计分析。结果：最终纳入30个研究,研究存在中度或高度偏倚的可能性。Meta分析结果显示，术前化疗加手术治疗与单纯手术比较，能提高肾母细胞瘤肿瘤缩小率、肿瘤全切率和术后无瘤生存率，两组差异有统计学意义[分别为OR=37.28，95%CI（20.18，68.81），P=0.0000；OR=5.923，95%CI（3.14，10.95），P=0.000；OR=2.03，95%CI（1.58，2.60），P=0.000]。结论：术前化疗能提高儿童肾母细胞瘤肿瘤缩小率、肿瘤全切率和可能提高术后无瘤生存率。

诸明,徐卓群,阮钧,王志荣^[8]（2011）在《成人肾母细胞瘤4例报告并文献复习》文中研究说明目的提高成人肾母细胞瘤的诊治水平。方法结合文献回顾性分析4例成人肾母细胞瘤的诊治情况。结果 3例行根治性切除,其中2例死于术后转移;1例行肾部分切除术,至今一年半无瘤生存。结论成人肾母细胞瘤是一种罕见的恶性肿瘤,术前诊断较困难。早期发现及诊断、手术治疗并辅以放疗、化疗等可明显提高治愈率及改善其预后。

张谦^[9]（2010）在《蛋白质组学技术在小儿肾母细胞瘤临床中的应用研究》文中提出研究背景：肾母细胞瘤（Nephroblastoma）是婴幼儿最常见的腹部肿瘤,亦称肾胚胎瘤或Wilms瘤,美国国家肾母细胞瘤研究组（NWTS）调查显示：手术切除加术后规范化疗,肾母细胞瘤Ⅰ期患儿8年存活率为90.5%～98.9%,Ⅱ～Ⅲ期为73.4%～88.7%,Ⅳ期仅为45.0%～57.1%。早期筛选及诊断并及时治疗对其预后有显着意义。但目前所使用的临床检查手段,尚不能满足对肾母细胞瘤早期筛选及诊断的要求。NWTS在其2001年的总结中提到：应用CT诊断直径小于3cm的肾母细胞瘤,仍有7%的漏诊率。因此,探索和建立一种简单、快速、敏感性高和特异性强的早期诊断技术已经成了临床医学上的迫切需要。任何疾病在出现病理变化之前,细胞内的蛋白质在成分和数量上都会有相应的改变,因此在理论上,通过对蛋白质的动态观察可以筛选出疾病早期的指标和征兆。当然实现这种诊断的前提是要找到各种疾病的特殊标志的分子,这种筛选是高通量的,用以前的常规方法很难做到。研究显示,肾母细胞瘤与一些基因的表达有关,比如WT1（11p13）,WT2（11p15）,在16p,1p and 17p发生基因突变。但是,由于WT1仅在15%的肾母细胞瘤患儿体内发现,而且目前其机理尚不清楚,这些基因不能被作为肾母细胞瘤早期诊断和判断预后的特异性标记物。蛋白质组学以细胞内全部蛋白质的存在及其活动方式为研究对象,开辟了生命科学研究进入后基因组时代的新天地,也为临床医学研究提供了全新的技术手段和思维模式。目前,对恶性肿瘤蛋白质标记物的检测已经成为肿瘤研究的热点。美国Ciphergen公司研制的表面增强激光解析电离飞行时间质谱SELDI-TOF-MS （Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight-Mass Spectrometry）技术,可以非特异性地结合被测样本中的各种蛋白质,当在质谱仪中受激光轰击时,各种结合的蛋白质会被激发而形成气化离子,由于不同质荷比的离子在电场中飞行的时间长短不一,因此接收装置可根据蛋白质质荷比的不同及量的多寡,直观的用位置、强弱不同的峰表现出来,进而形成图谱用于分析。SELDI蛋白指纹技术在吸收传统质谱技术的基础上,克服了常规蛋白检测技术的缺点,增加了特异性蛋白芯片阅读系统和生物信息学分析软件,事实证明,血清、尿液等体液中含有许多疾病早期诊断的标志物,这是因为疾病早期就可在蛋白质水平出现未知的细微但重要的组合改变,蛋白质芯片技术使这种在复杂的背景中捕捉微小差异的研究成为可能。而且整个测定过程可以在几十分钟内完成,具有样品用量小、操作简便、灵敏度高、高通量等优点,目前已成功将其应用于卵巢癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、甲状腺癌、肝癌等恶性肿瘤的诊断、肿瘤标志物的筛选及其他蛋白质组学研究中。本实验应用SELDI-TOF-MS技术结合支持向量机（SVM）的方法,对各期未经治疗肾母细胞瘤患儿、手术治疗后的肾母细胞瘤患儿和健康儿童血清血清蛋白质组进行检测,筛选出特异的蛋白质标记物,建立用于肾母细胞瘤早期诊断、临床分期及预后监测的血清蛋白质指纹图谱模型。在此基础上,确定待鉴定目标蛋白质；将待鉴定目标蛋白质经多维液相色谱分离纯化（HPLC）、酶解、运用串连液质联用质谱（LTQ）扫描后进行分析获得肽质量指纹图谱（PMF）,通过SEQUEST软件在BIOWORK蛋白质数据库中检索,并运用生物信息学鉴定蛋白质,分析蛋白的生物学意义和生物学功能,作为肾母细胞瘤标志物的候选蛋白。研究目的：检测肾母细胞瘤患儿的血清蛋白质,筛选其特异性蛋白质标记物,构建用于肾母细胞瘤早期诊断、临床分期及预后监测的血清蛋白质指纹图谱模型。并对目标蛋白进行鉴定。材料与方法：1.材料：血清标本130例自2006年6月至2008年12月,在郑州大学第一附属医院小儿外科获得。其中,肾母细胞瘤术前标本30例（Ⅰ期6例,Ⅱ期10例,Ⅲ期10例,Ⅳ期4例）、术后2周24例（行根治术21例,行姑息切除术3例）、术后3月和6月各23例。30例术前肾母细胞瘤标本均经2位以上病理学医师证实。其中男21例,女9例。年龄24 d～10岁,平均2.8±1.6岁。门诊体检的健康儿童30例做为正常对照组。与患儿年龄、性别相匹配,男21例,女9例,平均年龄2.6±0.1岁。外周静脉血标本均于清晨空腹时抽取,静置1小时后3000rpm离心10min,收集血清样本,将样本进行编号,标记后分装储存于-80℃保存。2.主要试剂和仪器：来自中国科学研究院生物物理研究所：三氟乙酸（TFA瑞士Fluka公司）、乙腈（ACN美国Fisher Scientific公司）、细胞色素C（分子量12361.96）、胰岛素（分子量5734.51）、a-氰基-4-羟基肉桂酸（CHCA）、胰蛋白酶（美国Promega）、碘乙酰胺（IAM德国AppliChem公司）、二硫苏糖醇（DTT德国BIO-RAD）、Ziptip C18吸管尖（美国Millipore公司）、SPD SpeedVac真空离心浓缩系统（美国Thermo Electron公司）、液相色谱仪LC-lOAvp（日本—岛津SHIMADZU公司）、新型基质辅助激光电离飞行时间质量分析系统（MALDI-TOF MS） AXIMA-CFRTMplus（英国Kratos Analytical公司）、LTQ线性离子阱液质联用质谱仪（美国Thermo Finnigan公司）。3.质谱分析前样本的制备过程（1）确立目标蛋白质SELDI蛋白芯片操作路线：冰浴中解冻血清标本,4℃10000rpm（离心半径0.5 m）离心2 min。取96孔板置冰盒上,每孔加U9（9 mol／L尿素,2%CHAPS,1%DTT）10μl,血清5μl,4℃层析柜600 rpm振荡30 min。在震荡结束前15 min做芯片预处理,芯片装入Bioprocessor中,记下芯片号,每孔加NaAC （100 mmol/L, pH 4）200μl,层析柜中600 rpm振荡2 min,重复以上操作1次。U9处理后的96孔板置冰上,排枪加NaAC 185μl,层析柜4℃600 rpm震荡2 min。取已处理的样本100μl加到芯片上,置层析柜4℃600 rpm结合1h,甩去残液,快速拍干。加NaAC 200μl,600 rpm振荡5 min后,甩掉,拍干,重复3次。200μl去离子水冲洗各孔2次,快速甩干。每孔分两次加入50%饱和的SPA 1μl,干燥后上机待测。数据收集与处理：用已知分子量的蛋白芯片将SELDI-TOF-MS系统校正到分子量误差小于0.1%。将结合好蛋白质的WCX2蛋白芯片用质谱阅读仪分析。以质控血清作重复性检测。所有数据用Proteinchip Software 3.1做校正,使总离子的强度及分子量均一化。ZUCI-ProteinChip Data Analyze System软件包分析。质谱原始数据经过滤噪音,聚类分析处理后,对初步筛选出的质荷比峰数据做Wilconxon秩和检验,检验标准取a=0.01。使用线性的支持向量机（SVM）分类器,具体设置：采用径向基核函数,Gamma值设为0.6,罚分函数（c）设为19。特征向量的选取采用统计过滤结合模型依赖性筛选的方法,建立判别模型,用留一法交叉验证评估模型的判别效果。（2）纯化目标蛋白质于—80℃冰箱中取出血清样本,冰水浴中解冻。解冻后，取血清100μl,加入350μl超纯水,再加入700μl 1纯ACN。将上述混合液置入—20℃冰箱中,30 min后取出,离心10 min（13000 rpm）。取离心后的上清液移入新试管,置入SPDSpeedVac中冻干约20 min。将冻干后的样品上样至高效液相色谱仪（HPLC）中。收集不同时间的纯化液。将纯化出的蛋白液置入SPD SpeedVac中冻干,冻干至约20μl。将上述样品与CHCA各取1．5μl,两者混合后点样至MALDI靶板上,待干同时用Cytochrome C+CHCA和Insulin+CHCA校样。将靶板置入MALDI-TOF-MS中检测,找出SELDI-TOF-MS所筛质荷峰值的特异样本。（3）蛋白质酶解将蛋白液加超纯水至容积为40μl,再加入配好的浓度为0.1 mol的DTT溶液（11 mol的DTT溶液5μl+45μl的超纯水）4μl后,置于37℃温水中水浴1 h。向44μl的溶液中加入1．6μl的IAM后避光放置1 h。向45．6μl的溶液中依次加入1.6μl的1mol的DTT溶液,150μl的0.1 mol的NH4HCO3（碳酸氢氨）溶液和2μl的胰蛋白酶,然后置于37℃温水中过夜（6-8 h）。4.蛋白质鉴定取经酶解后蛋白液填柱上样。将样品全部上到毛细色谱柱上,经过液质联用质谱扫描后得到得肽质量指纹图谱,经过SEQUST检索程序在Bioworks数据库查询。运用生物信息学鉴定蛋白质,分析蛋白的生物学意义和生物学功能,作为肾母细胞瘤标志物的候选蛋白。5.统计学处理实验数据用x±s表示,根据数据类型采用不同的检验方法。患儿术前与正常对照组；肾母细胞瘤患儿各期；手术前后、术后与正常对照组的质谱数据分析使用t检验,各分期的质谱数据使用单因素方差分析,方差不齐使用秩和检验,以P(0.05做为差异有显着性的检验标准。全部统计计算均在SPSS13.0软件处理包下完成。结果：1.应用SELDI-TOF-MS技术对肾母细胞瘤患儿血清蛋白标记物筛查1.1肾母细胞瘤血清蛋白质指纹图谱实验方法的建立及蛋白质芯片种类的筛选：本研究对血清样本处理时使用了0.5%CHAPS,应用Cibacron Blue 3G特异性地除去血清中的白蛋白,通过对4种不同的蛋白芯片WCX2蛋白芯片、SAX2蛋白芯片、IMAC3蛋白芯片及H4蛋白芯片研究发现,不同芯片所能结合的血清蛋白质的数量不同,H4芯片在本研究中证实能得到更多有意义的峰值,可更好地应用于肾母细胞瘤血清蛋白质指纹图谱的研究,而且具有很好的重复性。1.2本研究首次报道运用SELDI-TOF-MS技术结合SVM建立肾母细胞瘤血清蛋白质指纹图谱模型。60例血清标本的蛋白质指纹图谱经质谱仪收集数据,随机分为训练组和测试组。在收集每次实验数据前用己知分子量的标准蛋白芯片校正,误差小于0.1%。以质控血清作重复性检测,其峰值大小及其强度的变异系数（CVs）均控制在误差范围内（0.05%和15%以下）,应用ProteinChip Software 3.1（Ciphergen Inc）软件同时将所有样本的质谱数据M/Z在2000到30000的峰值进行两次信噪比过滤,找出样本质荷峰,以10%为最小阈值对质荷峰进行聚类。采用Wilcoxon秩和检验分析,根据P值评价各个峰对区分两类样本的相对重要性。将差异显着的质荷峰随机组合输入SVM,筛选标志物,建立判别模型。用留一法交叉验证评估模型,进行盲法测试。按排列顺序依次增加M/Z峰,本研究发现,测试集的youden指数在M/Z的组合为5的时侯最佳,效果可达98.6%的准确率。这5个M/Z峰分别为6455,6984,3221,5639,9190。用30例样本做训练,30例样本做为盲法测试样本。建立模型的特异度为98.3%（95%的可信区间为85%～100%）,敏感度为98.9%（95%的可信区间为89%～100%）,Youden指数值为0.87551,表明该模型在鉴别肾母细胞瘤中有很好的诊断价值。1.3 M/Z峰分别为6455、6984、3221、5639、9190的质谱图显示,它们在肾母细胞瘤中低表达,在健康儿童中高表达。其中,M/Z位于6455,9190的峰值在健康儿童、肾母细胞瘤患儿中表达依次降低,设想M/Z 6455,M/Z 9190的蛋白质可能在肾母细胞瘤的发生发展中起重要作用。2.血清蛋白标记物在肾母细胞瘤患儿临床分期及预后中的应用2.1经过初步筛选,得到肾母细胞瘤Ⅰ期组和肾母细胞瘤Ⅱ期组质谱483个M/Z峰,筛选出3个M/Z峰5022.4、7965.4和8469.6,它们在肾母细胞瘤Ⅰ期组中高表达,在肾母细胞瘤Ⅱ期组中低表达。在测试集上判别模型的敏感性为80.00%,特异性为100.00%。肾母细胞瘤Ⅰ期组和肾母细胞瘤Ⅲ期组质谱496个M/Z峰,筛选出4个M/Z峰4330.7、4303.7、4263.2和4122.8，它们在肾母细胞瘤Ⅰ期组中高表达,在肾母细胞瘤Ⅲ期组中低表达。在测试集上判别模型的敏感性为100.00%,特异性为100.00%。肾母细胞瘤Ⅰ期组和肾母细胞瘤Ⅳ期组质谱565个M/Z峰,筛选出2个M/Z峰8179.1和10836.6,它们在肾母细胞瘤Ⅰ期组中高表达,在肾母细胞瘤Ⅳ期组中低表达。在测试集上判别模型的敏感性为88.89%,特异性为100.00%。肾母细胞瘤Ⅱ期组和肾母细胞瘤Ⅲ期组质谱490个M/Z峰,筛选出2个M/Z峰4143.2和5019.2,它们在肾母细胞瘤Ⅱ期组中高表达,在肾母细胞瘤Ⅲ期组中低表达。在测试集上判别模型的敏感性为88.89%,特异性为100.00%。肾母细胞瘤Ⅱ期组和肾母细胞瘤Ⅳ期组质谱508个M/Z峰,筛选出M/Z峰为7976.5在肾母细胞瘤Ⅱ期组中高表达,在肾母细胞瘤Ⅳ期组中低表达。在测试集上判别模型的敏感性为100.00%,特异性为100.00%。肾母细胞瘤、Ⅲ期组和肾母细胞瘤Ⅳ期组质谱504个M/Z峰,筛选出M/Z峰为8194.4在肾母细胞瘤Ⅲ期组中高表达,在肾母细胞瘤Ⅳ期组中低表达。在测试集上判别模型的敏感性为93.75%,特异性为100.00%。肾母细胞瘤Ⅰ+Ⅱ期组和肾母细胞瘤Ⅲ+Ⅳ期组质谱519个M/Z峰,筛选出2个M/Z峰3257.6和4153.9,它们在肾母细胞瘤Ⅰ+Ⅱ期组中高表达,在肾母细胞瘤Ⅲ+Ⅳ期组中低表达。在测试集上判别模型的敏感性为83.33%,特异性为93.75%。2.2随着患儿临床分期的增高,M/Z位于6455,9190的峰值在肾母细胞瘤患儿血清中表达依次降低。2.3肾母细胞瘤患儿SELDI分期：Ⅰ期6例,Ⅱ期10例,Ⅲ期10例,Ⅳ期4例,30例肾母细胞瘤分期均与病理结果相一致,各期符合率为100.00%。通过病理及手术证实,CT各期符合率依次为100.00%,85.00%,85.00%,75.00%。2.4肾母细胞瘤手术前、后组比较筛选到差异最显着的m/z位于6455.5、9190.8处的蛋白质标志物,在术前组血清中低表达,术后组及健康儿童组中呈高表达,差异有统计学意义（P<0.01）；术后组和正常小儿组间差异无统计学意义（P>0.01）。表明瘤体切除后,这种抑制作用被削弱,蛋白质表达升高。2.5对肾母细胞瘤患儿手术后血清蛋白质谱及健康儿童组比较,发现将21例根治术后与术前患儿标本比较,M/Z峰值位于6455.5表达在术后2周、3个月和6个月,根治术组分别为2087.21±658.33、2189.67±856.42和2232.16±598.32（与对照组比较：P>0.05；与术前组比较：P<0.01）,姑息术组分别为1044.86±533.21、677.86±435.26和431.65±158.31（与对照组比较：P<0.01；与术前组比较：P>0.05）；M/Z峰值位于9190.8表达在术后2周、3个月和6个月,根治术组分别为1101.20±219.69、1078.21±322.43和1066.06±110.45（与对照组比较：P>0.05；与术前组比较：P<0.01）,姑息术组分别为328.11±210.26、289.10±108.09和276.49±92.15（与对照组比较：P<0.01；与术前组比较：P>0．05）。姑息术组在术后2周、3月、6月血清中2个蛋白标记物呈持续低表达；根治术患儿术后3月、6月跟踪复查发现血清蛋白质在此两个峰值表达无明显改变。分期愈低,预后愈好,M/Z强度愈高。考虑3例姑息性切除术由于仍有瘤体存在,被抑制的蛋白质持续受到抑制,蛋白质标记物呈持续低表达,除1例术后2月死亡外,2例术后3及6个月表达继续下降,可能是该蛋白质标记物被抑制加深的结果。3.肾母细胞瘤血清蛋白质标记物的鉴定在本实验中,我们将质荷峰为6455.5、9190.8的血清样本确立为目标蛋白质,通过鉴定二者的氨基酸序列,蛋白质数据库搜索,与这2种差异蛋白质分子量相对应的蛋白质分别为：载脂蛋白C-Ⅰ和触珠蛋白。我们推测,载脂蛋白C-Ⅰ、触珠蛋白可能是判定肾母细胞瘤恶性程度鉴别、治疗转归、预后发展的候选蛋白。结论：用蛋白组学技术筛选出的特异性生物标志物载脂蛋白C-Ⅰ、触珠蛋白是肾母细胞瘤早期诊断、临床分期及预后监测的候选蛋白。

欧阳墉^[10]（2008）在《经导管动脉灌注术和栓塞术在我国的发展历程及其现状》文中提出经导管动脉灌注和栓塞术（transcatheter arterial infusion and embolization,TAI&TAE）于20世纪80年代引入我国,也是我国最早应用于临床的介入治疗技术。时至今日TAI/TAE历经20余年的不断改进,现已被广泛用于治疗许多疾病,包括肿瘤、血管畸形、出血和一些静脉疾患等介入治疗。本文通过复习国内1981年至2006年间主要的相关文献,对TAI/TAE在我国的发展历程及其现状作了一概述和讨论。

二、术前肾动脉化疗及栓塞在儿童肾母细胞瘤的应用（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、术前肾动脉化疗及栓塞在儿童肾母细胞瘤的应用（论文提纲范文）

（1）顺铂对肾母细胞瘤细胞株体外影响的初步研究（论文提纲范文）

（3）以肾脏外伤为首发症状的肾母细胞瘤（附5例报告并文献复习）（论文提纲范文）

（4）儿童肾脏及肾上腺占位性病变的临床及CT研究（论文提纲范文）

（6）儿童肾母细胞瘤经动脉化疗栓塞术的护理（论文提纲范文）

（7）术前化疗对儿童肾母细胞瘤疗效的Meta分析（论文提纲范文）

（9）蛋白质组学技术在小儿肾母细胞瘤临床中的应用研究（论文提纲范文）

（10）经导管动脉灌注术和栓塞术在我国的发展历程及其现状（论文提纲范文）

四、术前肾动脉化疗及栓塞在儿童肾母细胞瘤的应用（论文参考文献）

• [1]顺铂对肾母细胞瘤细胞株体外影响的初步研究[D]. 周家华. 广西医科大学, 2019(08)
• [2]儿童中晚期肾母细胞瘤术前经肾动脉栓塞化疗的疗效对比评价[J]. 贾绚,赖灿,潘海鹏,周海春,杨丽,费正华. 中华医学杂志, 2019(15)
• [3]以肾脏外伤为首发症状的肾母细胞瘤（附5例报告并文献复习）[J]. 张高峰,王盛兴,白明,张敬悌. 临床泌尿外科杂志, 2017(04)
• [4]儿童肾脏及肾上腺占位性病变的临床及CT研究[D]. 鄂天娇. 上海交通大学, 2016(03)
• [5]术前经动脉化疗栓塞治疗婴儿肾母细胞瘤的疗效观察[J]. 孙志南,胡东来,黄益平,陈俊杰,金红来,徐胜,郭晓东. 浙江医学, 2016(02)
• [6]儿童肾母细胞瘤经动脉化疗栓塞术的护理[J]. 周晶,李春旺,定明艳,张小芳,刘一帆. 中国卫生产业, 2013(34)
• [7]术前化疗对儿童肾母细胞瘤疗效的Meta分析[D]. 贾俊君. 重庆医科大学, 2012(01)
• [8]成人肾母细胞瘤4例报告并文献复习[J]. 诸明,徐卓群,阮钧,王志荣. 国际泌尿系统杂志, 2011(05)
• [9]蛋白质组学技术在小儿肾母细胞瘤临床中的应用研究[D]. 张谦. 郑州大学, 2010(06)
• [10]经导管动脉灌注术和栓塞术在我国的发展历程及其现状[J]. 欧阳墉. 介入放射学杂志, 2008(12)

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