一、微波辐射在PAS组化染色中的应用（论文文献综述）
李莎[1]（2020）在《肺癌的氟-19磁共振/荧光/光声多模态影像研究》文中研究指明肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。早期精确诊断是提高其治愈率的关键,因此,发展准确有效的医学影像技术受到人们的广泛关注。作为一种非侵入式的分子影像技术,磁共振成像（Magnetic resonance imaging,MRI）无电离辐射,适用于对软组织成像并且无穿透深度限制。由于19F在体内无背景信号干扰,19F-MRI在生物成像和疾病诊断等领域也得到越来越多的应用,但依然存在灵敏度低的缺点。而荧光成像（Fluorescence imaging,FLI）的灵敏度非常高,但穿透深度有限。另外,光声成像（Photoacousticimaging,PAI）结合了光学成像的高灵敏度和声学成像良好的穿透深度,能获得肿瘤微血管结构的高分辨率图像。因此将19F-MRI与荧光成像、光声成像结合,既能更好的将解剖学信息与空间分辨率融合在一起,又能高灵敏度地在分子水平上获得生物学信息。本论文针对肺腺癌细胞和肿瘤的特异性检测,基于19F-MRI、荧光、光声等分子影像技术的优缺点,开展了以下几个方面的工作:本论文第二章研究内容中,发展了一种微波法一步反应制备水溶性的氟化硅纳米颗粒（Fluorinated silicon nanoparticles,19FSiNPs）的方法。该方法摒弃了传统硅量子点合成与修饰过程中涉及的复杂反应步骤。制备得到的19FSiNPs具有高的荧光量子产率、强的19F-MRI信号、良好的生物相容性和水溶性。另外,19FSiNPs表面带有丰富的氨基,通过偶联靶向多肽RGD,可作为19F-MRI/荧光双模态成像探针特异性检测肺腺癌A549细胞。活体实验也证明19FSiNPs适用于肿瘤的19F-MRI/荧光双模态成像。本论文第三章研究内容中,用聚乳酸羟基乙酸共聚物（Poly（lactic-co-glycolic）acid,PLGA）包裹全氟-15-冠-5-醚（Perfluoro-15-crown-5-ester,PFCE）,同时负载吲哚菁绿（Indocyanine green,ICG）,再将提取的肺腺癌A549细胞膜对该纳米颗粒进行涂层修饰,构建了一种癌细胞膜仿生纳米探针（AM-PP@ICGNPs）。一系列体外实验证明,AM-PP@ICGNPs具有良好的稳定性、生物相容性和光热升温作用,能特异性靶向和识别同源的A549细胞,在近红外激光的照射下,对细胞能产生明显的光热毒性。第四章的研究工作是在第三章研究工作的基础上,以肺腺癌A549细胞异位移植的荷瘤裸鼠为研究对象,经过一系列体内实验进一步评估了AM-PP@ICGNPs的肿瘤靶向能力、19F-MRI/荧光/光声多模态造影能力以及抑制肿瘤生长能力。结果证明,AM-PP@ICGNPs系统性注射进荷瘤裸鼠体内后,可通过同源靶向作用在肿瘤部位高效富集。FLI可以高灵敏度地显示NPs对肿瘤的归巢能力,19F-MRI提供了高空间分辨率的肿瘤定位,PAI可以显示出NPs在肿瘤内的异质分布。此外,用近红外激光照射肿瘤部位,局部迅速升温,可消融肿瘤细胞,能有效抑制肿瘤的生长。并且整个治疗方案体现出良好的生物安全性,不造成全身毒性。体内实验证明AM-PP@ICGNPs可作为一种多功能纳米复合探针实现肿瘤的诊疗一体化。综上所述,我们设计和构建了分别以SiNPs和PLGA为载体的多功能纳米复合探针,用于肺腺癌细胞的选择性识别,所构建探针还可以特异性靶向肺腺癌肿瘤,实现同步诊疗应用。
宗帅[2]（2020）在《粒毛盘菌多糖抗肿瘤作用及其机制研究》文中研究说明前期,本课题组已经对粒毛盘菌YM130胞外多糖（LEP130）的结构进行了解析,并发现了LEP130的抗肿瘤活性。然而其抗肿瘤作用机制尚不清楚。本文研究了LEP130的抗肿瘤作用及其与化疗药物的协同作用,并对其作用机制进行了初步的探讨。主要研究结果如下:1)利用体外实验研究了LEP130与5-氟尿嘧啶（5-FU）联用对Hep G2细胞的抑制作用。MTT实验结果表明,LEP130与5-FU联用对Hep G2细胞活性具有显着的抑制作用,该抑制作用强于LEP130或5-FU单独处理,并且两者间具有显着的协同作用。而LEP130对人皮肤成纤维细胞HSF、人正常肝细胞LO2没有明显作用,这表明LEP130对正常细胞是安全无毒的。Western blot等实验结果表明,LEP130能降低胸苷酸合酶和二氢嘧啶脱氢酶的表达,从而抑制5-FU的降解失活。另外,LEP130能抑制Ras/Raf/MEK/ERK和PI3K/Akt/m TOR介导的细胞存活通路,增强Hep G2细胞对5-FU的敏感性,防止细胞产生耐药性。LEP130还能抑制Nrf2介导的细胞抗氧化防御系统,增加细胞内活性氧,并破坏线粒体膜电位,激活线粒体凋亡途径。还发现,LEP130能促进p53活化,抑制NF-κB及其下游靶蛋白的表达,导致细胞周期停滞在S期,并且抑制DNA碱基切除修复和错配修复,继而增强5-FU的作用效果。因此,LEP130与5-FU通过多种方式发挥体外抑制Hep G2细胞的协同增效作用。2)采用H22荷瘤小鼠模型,研究了LEP130与环磷酰胺（CTX）对H22肿瘤生长的抑制作用。结果表明,LEP130能激活Fas/Fas L介导的死亡受体途径,增加相关蛋白（如caspase 3、caspase 8、PARP1等）的表达,并通过t-Bid激活线粒体凋亡途径。LEP130还能通过抑制血管生成相关蛋白（如VEGF、b FGF、MMPs等）的表达,减少瘤内血管生成。此外,LEP130能提高H22荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数,促进T细胞、NK细胞和巨噬细胞向肿瘤组织中浸润,增加血清和肿瘤组织中免疫因子（IFN-γ、IL-1β、IL-2和TNF-α）的含量,继而激活抗肿瘤免疫系统抑制肿瘤的生长。还发现,LEP130能抑制Stat3和NF-κB介导的细胞存活蛋白（如Bcl-2、Bcl-XL、Survivin等）的表达,并抑制H22肿瘤细胞产生多药耐药性,继而增强CTX的抑瘤作用。同时发现LEP130能显着改善由CTX导致的肝损伤、肾损伤、免疫抑制等副作用,促进机体恢复健康。以上结果表明,LEP130与CTX联用能协同抑制H22荷瘤小鼠肿瘤的生长,并且LEP130能缓解CTX引起的副作用。3)利用S180荷瘤小鼠模型,研究了LEP130对抗肿瘤免疫系统的作用。体外实验表明LEP130不能抑制S180细胞的增殖,而体内实验证实LEP130能显着抑制S180荷瘤小鼠肿瘤的生长。实验结果表明,LEP130主要通过激活机体免疫系统来发挥抑瘤作用。对S180荷瘤小鼠进行灌胃处理后发现,LEP130能引起辅助性T细胞向Th1型极化,并促进Th1细胞因子（IL-2和IFN-γ）的表达;抑制辅助性T细胞向Th2型极化,并抑制Th2细胞因子（IL-4和IL-10）的表达。另外,LEP130引起的高水平的IFN-γ被证明能调节肿瘤微环境中的巨噬细胞分型,促进巨噬细胞向M1型极化,继而发挥抑瘤作用。此外,LEP130能通过增加抑瘤性免疫细胞（如白细胞、B细胞和NK细胞等）和抑瘤性免疫细胞趋化因子（如CXCL9、CXCL10和CXCL13等）,抑制免疫抑制性细胞（如骨髓源性抑制细胞、调节性T细胞等）、免疫抑制细胞趋化因子（如G-CSF、M-CSF、CCL22等）以及免疫抑制因子（如TGF-β、IL-10、PEG2等）,改善免疫抑制性肿瘤微环境,增强免疫系统对肿瘤细胞的杀伤作用。最后,体外实验表明,LEP130能通过TLR4介导的NF-κB信号通路直接诱导原代巨噬细胞向M1型转化,发挥抑瘤作用。以上结果表明,LEP130能激活机体免疫系统抑制S180荷瘤小鼠肿瘤的生长。4)采用AOM/DSS诱导的小鼠结肠癌模型,研究了LEP130对结肠癌的抑制作用以及对肠道菌群的影响。LEP130能显着缓解AOM/DSS导致的结肠癌小鼠体重减轻、结肠长度缩短,并有效抑制了结肠肿瘤的发生。另外,LEP130能显着改善结肠癌小鼠肠道的病理状况,缓解AOM/DSS导致的肠道损伤,并通过增加ZO-1、occludin、E-cadherin等蛋白的表达恢复肠屏障完整性。LEP130还能降低结肠癌小鼠结肠组织中的促炎因子（TNF-α、IL-6、IL-1β和IFN-γ）水平,抑制组织炎症。16S r RNA高通量测序结果表明,LEP130能改善结肠癌小鼠肠道菌群的结构与组成,增加肠道菌群的丰度和物种多样性。LPE130能降低（机会）致病菌和病原菌（如副杆菌属、大肠志贺氏杆菌、脱硫弧菌属、螺杆菌属、毛螺菌属-NK4A136组和厌氧支原体属等）的相对丰度,并增加短链脂肪酸产生菌和益生菌（如瘤胃梭菌属、毛螺菌属、雷沃氏菌属-NK3B31组、双歧杆菌属和罗斯氏菌属等）的相对丰度。非靶向代谢组学结果表明,LEP130能显着改善结肠癌小鼠肠道菌群的代谢状况,降低肠道中鹅去氧胆酸、脱氧胆酸和石胆酸含量,增加短链脂肪酸（乙酸、丙酸、正丁酸）和δ-生育酚含量,从而抑制结肠癌的发生。相关性分析结果表明,肠道菌群的调节与代谢物的变化具有高度的相关性。以上结果表明,LEP130能够抑制结肠癌的发生,并且这种抑制作用可能与LEP130对肠道微生物群及其代谢产物的调节相关。
张凯[3]（2020）在《功能化金属有机框架纳米材料在肿瘤诊疗中的应用》文中指出近年来,随着纳米医学的快速发展,将纳米材料技术、表面修饰技术与生物医学技术相结合构建集诊断与治疗为一体的多功能纳米诊疗平台,在肿瘤的精准医疗与临床应用中显示出巨大的发展前景。金属有机框架（MOFs）纳米材料由于其独特的性能,尤其是可谐调的晶体结构、大的比较面积、孔隙率高等优点,使其在肿瘤的多模式影像学诊断与多方式协同治疗中表现出极大的应用潜力。基于以上研究背景,我们设计并构建了四种基于MOFs的多功能纳米结构,探究其在肿瘤的多模式影像学诊断与多方式高效协同治疗中的应用,具体内容包括以下四个工作:1.金属-有机框架纳米梭用于肿瘤的光动力和低温光热协同治疗:通过简单的一步水热合成法制备了一种新型的多功能锆-铁卟啉金属有机框架纳米梭材料（Zr-FePMOF）。在近红外光照射下,Zr-FePMOF纳米梭可产生丰富的以羟基自由基（·OH）和单态氧（1O2）为主的活性氧。同时Zr-FePMOF纳米梭具有显着的光热效应,其光热转换效率高达33.7%。在635 nm光照射下,负载了热休克蛋白70（Hsp70）的小干扰RNA（siRNA）的Zr-FePMOF纳米梭在光动力治疗（PDT）与低温光热治疗（PTT）的协同作用下,可有效抑制肿瘤生长。此外,该纳米体系还具有良好的光热成像、CT成像和光声成像三模式肿瘤特异性成像性质,可用于肿瘤的准确诊断。2.金属-有机框架纳米片作为超氧自由基产生器用于光声成像指导的乏氧条件下的光动力治疗:合成了一种以菌绿素为配体、Hf6（μ3-0）4（μ3-OH）4纳米簇为节点的多功能DBBC-UiO MOF纳米片。在750nm的近红外光照射下,在缺氧的肿瘤微环境中,该纳米片通过Ⅰ型机制产生丰富的超氧自由基（O2-.）,其中一部分在超氧化物歧化酶介导的歧化反应中转化为高细胞毒性的·OH。由于其高效的自由基生成能力,该纳米体系对肿瘤细胞的致死率高达91%,同时实现了活体内高效的低氧实体肿瘤消融。此外,DBBC-UiO MOF纳米片也具有光声成像性质,可用于癌症的诊断。利用750 nm近红外光的高效组织穿透性和DBBC-UiO MOF独特的低氧条件产生自由基的能力,为临床低氧性癌症的PDT提供了新方案。3.上转换纳米粒子/金属-有机框架/二氧化钛纳米复合体系用于单一光激发的多模式肿瘤光动力治疗:受二氧化钛（TiO2）和卟啉基MOFs的光化学反应启发,本部分工作将上转换纳米颗粒（UCNPs）原位生长于卟啉基MOFs表面,并修饰一层超小的TiO2纳米颗粒,合成了一种多功能上转换纳米粒子/金属-有机框架/二氧化钛（UMOF-TiO2）纳米平台,在980nm近红外光照射下,激发UCNPs产生紫外光和近红外光,随后进一步激发TiO2和卟啉MOF介导的光化学反应,通过Ⅰ型和Ⅱ型机制实现肿瘤的多模式PDT。该UMOF-TiO2光敏剂具有良好的生物相容性和高效的光动力作用,为深层次肿瘤的高效光动力治疗提供了一种新的研究思路与方法。4.乏氧响应的铜-金属-有机框架（Cu-MOF）用于肿瘤的高效治疗及活体microRNA成像检测:合成了一种低氧响应的铜-金属-有机框架纳米颗粒（Cu-MOF NPs）,装载声敏剂二氢卟吩（Ce6）后得到Cu-MOF/Ce6纳米体系,用于谷胱甘肽（GSH）介导的化学动力学（CDT）和声动力（SDT）协同的肿瘤治疗,同时高效负载DNA探针,实现肿瘤细胞内及活体肿瘤组织中目标microRNA的灵敏成像检测与表达水平的实时动态监控。Cu-MOF NPs在正常氧含量条件下表现出良好的稳定性,较大的纳米尺寸增强了其在肿瘤部位的积累,而当处于低氧肿瘤微环境（TME）下,纳米材料被降解为小尺寸纳米粒子同时释放出Cu2+和Ce6,增强其在瘤内的穿透性。Cu2+被细胞内高含量的GSH还原为Cu+,随后Cu+催化内源性的H2O2生成高细胞毒性的·OH。释放的Ce6经超声处理,实现肿瘤的SDT。GSH的消耗显着增强了CDT/SDT的协同治疗效果,实现了肿瘤的选择性高效治疗。Cu-MOFNPs具有延长血液循环时间、高效瘤内组织穿透性、增强CDT/SDT协同作用等优势,是一种具有良好应用潜力的抗癌药物。
胡冠英[4]（2018）在《百秋李醇治疗高血压性肾损害作用机制研究》文中认为目的:研究百秋李醇（patchouli alcohol,PA）对高血压性肾损害的治疗作用并探讨其可能的分子机制,为PA新药研究与开发提供理论依据。方法:取8周龄自发性高血压大鼠（spontaneously hypertension rat,SHR）60只,雌雄各半,适应性喂养1周后,随机分为:SHR组（等容积生理盐水）、溶剂组（等容积特级出榨橄榄油）、PA高(80 mg·Kg-1·d-1)、中(40 mg·Kg-1·d-1)、低剂量组(20 mg·Kg-1·d-1)、阳性组(卡托普利,2.5 mg·Kg-1·d-1),每组10只,雌雄各半。另设10只雌雄各半的魏凯氏（Wistar-Kyoto,WKY）大鼠为正常对照组（等容积生理盐水）。按以上剂量灌胃给药,连续8周。观察给药前及给药后每组大鼠一般情况、体重和尾动脉收缩压（systolic blood pressure,SBP）;末次给药后,称量大鼠体重,取肾脏,测量左、右肾湿重,计算肾脏质量指数;腹主动脉取血,分离血浆,采用肌氨酸氧化酶法检测血浆肌酐（Creatinine,Cr）水平,脲酶法检测血浆尿素氮（urea nitrogen,BUN）水平,酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测血浆肾素、血管紧张素（angiotensionⅡ,AngⅡ）、转化生长因子β1（transforming growth factorβ1,TGF-β1）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1）、短链脂肪酸（short-chain fatty acids,SCFAs）及肾组织肾素、AngⅡ、TGF-β1、PAI-1水平;HE及Masson染色分别观察肾脏肾小管损伤及胶原纤维的病理组织学变化;免疫组化法分析肾组织胶原纤维Ⅰ（collagenⅠ,ColⅠ）、胶原纤维（collagenⅢ,ColⅢ）和纤维黏连蛋白（Fibronectin,FN）表达;实时荧光定量PCR法（RT-PCR）检测大鼠肾组织α平滑肌激动蛋白（αsmooth muscle actin,α-SMA）、基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9,MMP-9）、组织型金属蛋白酶抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinase 1,TIMP-1）、ras、raf-1、细胞外信号调节激酶1和2(extracellular signal-regulated kinase 1 and 2,ERK1/2)表达;Western blot法分别测定肾组织α-SMA、ras、raf-1、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(phosphorylation ERK1/2,pERK1/2)蛋白表达水平。16SrRNA测序平台检测肠道菌群丰度、多样性及组成结构。结果:1 PA对SHR血压的作用研究与WKY组比较,SHR的一般状态表现为精神欠佳、活动减少、体毛欠光泽、大便偏硬、尿量减少;SHR体重增长减慢,尤其是给药后第2、3、8周体重增长率明显降低（p<0.01）;SBP随着周龄的增加呈波动性上升（p<0.01）;血浆肾素、AngⅡ、TGF-β1和PAI-I水平显着升高（p<0.05或p<0.01）;肾组织肾素、AngⅡ、TGF-β1和PAI-1水平无明显改变（p>0.05）。给予高、中、低剂量的PA治疗后,发现PA中剂量(40 mg·Kg-1)和低剂量组(20 mg·Kg-1)大鼠的一般情况明显改善,而剂量为80 mg·Kg-1的PA能使雄性SHR出现毛发粗糙,酱油尿,尾巴质硬、油状物渗出并伴有棕褐色结痂的药物毒性反应;PA中剂量组体重增长率在给药后第2周显着降低（p<0.01）而在给药后3周体重增长率却明显增加（p<0.01）,PA低剂量组体重增长率在给药后第1和第8周显着降低（p<0.05或p<0.01）;PA高、中、低剂量组SBP分别在给药后第6-8周、第7-8周和第8周显着降低（p<0.05或p<0.01）,且降压起效时间与其剂量呈明显的依赖关系,但降压幅度与其剂量无关;PA各剂量组血浆和肾组织肾素水平显着降低（p<0.05或p<0.01）;PA高剂量组血浆Ang II水平显着降低（p<0.01）;PA高、中剂量组肾组织PAI-I水平显着降低（p<0.01）;PA中、低剂量组血浆TGF-β1（p<0.05或p<0.01）和PAI-I水平显着降低（p<0.05）;PA低剂量组肾组织TGF-β1水平显着降低（p<0.05）。2 PA对SHR肾纤维化的作用研究与WKY组比较,SHR组左、右肾质量指数显着增加（p<0.01）;血浆Cr、BUN水平明显升高（p<0.05或p<0.01）;肾组织明显出现肾小管损伤、肾小球硬化、肾间质纤维化和炎症细胞浸润等病理改变,肾小管损伤和肾纤维化指数明显增加（p<0.01）;肾组织ColⅠ、Ⅲ、FN、raf-1蛋白和α-SMA、ERK1/2 mRNA表达显着增加（p<0.05或p<0.01）;肾组织MMP-9、TIMP-1、ras、raf-1 mRNA和α-SMA、ras、ERK1/2和pERK1/2蛋白无明显改变（p>0.05）。给予不同剂量的PA治疗8周后,观察到低剂量PA能显着降低左肾质量指数（p<0.05）;中、低剂量PA显着降低右肾质量指数（p<0.01）;高剂量PA能显着降低血浆BUN水平（p<0.05）,同时升高Cr水平（p<0.05）;各剂量PA明显减轻肾小管损伤（p<0.05或p<0.01）;中、低剂量PA显着抑制肾脏的纤维化（p<0.01）;各剂量PA显着降低肾组织ColⅠ表达（p<0.05或p<0.01）;中、低剂量PA显着降低FN（p<0.05或p<0.01）、α-SMA（p<0.05）和raf-1（p<0.05或p<0.01）蛋白表达;中剂量PA明显升高肾组织MMP-9 mRNA表达（p<0.05）和抑制α-SMA（p<0.05）、TIMP-1mRNA表达（p<0.05）;PA低剂量显着降低肾组织ras（p<0.05）、raf-1（p<0.05）、ERK1/2 mRNA（p<0.05）和Col III（p<0.01）、ERK1/2（p<0.05）、pERK1/2蛋白表达（p<0.05）;PA各剂量组对肾组织ras蛋白表达无明显作用（p>0.05）。3 PA对SHR肠道菌群的作用研究与WKY组比较,SHR组大鼠肠道菌群丰度、多样性有降低的趋势,但差异无统计学意义（p>0.05）;在门水平,拟杆菌门（Bacteroidetes）丰度显着降低（p<0.05）,F/B比值显着增加（p<0.05）,硬壁菌门（Firmicutes）和变形菌门（Proteobacteria）丰度降低,疣微菌门（Verrucomicrobia）丰度增加,但差异均无统计学意义（p>0.05）;属分类的LEfSe分析显示毛螺菌科（Lachnospiraceae）UCG 005和拟普雷沃菌属（Alloprevotell）丰度显着降低（p<0.01）,粪球菌属（Coprococcus）和消化链球菌属（Peptoclostridium）丰度显着增加（p<0.01）;血浆SCFAs降低,但差异无统计学意义（p>0.05）。经不同剂量的PA治疗后,发现Chao 1和Faith’s PD指数在PA高剂量组明显升高（p<0.05）;Shannon指数在PA高、低剂量组明显升高（p<0.05）而在PA中剂量组明显降低（p<0.05）;PA高剂量组Bacteroidetes和Proteobacteria丰度明显增加（p<0.05）,F/B比值明显降低（p<0.05）;PA中剂量组Firmicutes丰度明显降低（p<0.05）,同时Verrucomicrobia丰度明显增加（p<0.05）;PA高、中剂量组明显升高Lachnospiraceae UCG 005丰度（p<0.05或p<0.01）和降低Peptoclostridium丰度（p<0.01）;PA各剂量组Alloprevotella丰度明显增加（p<0.05或p<0.01）;PA低剂量组明显增加Coprococcus丰度（p<0.01）;PA各剂量组血浆SCFAs水平均不同程度地升高（p<0.01或p<0.05）。结论:1 PA对SHR大鼠有降血压和减轻高血压所致肾损害作用。但高剂量的PA(80 mg·Kg-1)在长期运用过程中可导致大鼠出现药物毒性反应并加重其肾损伤,提示PA在高剂量运用时应慎重。2 PA具有温和地降血压作用,其机制可能与抑制RAS,降低TGF-β1和PAI-1水平有关;3 PA可明显改善SHR肾纤维化的病理改变,对肾组织有直接的保护作用,其机制除与抑制RAS系统过度激活和TGF-β1、PAI-1水平增加外,还可能与抑制肾组织MFB的增殖和活化、减少基质蛋白的合成、促进ECM的降解和调控ras/raf-1/ERK1/2信号通路有关;4基于本实验中PA可引起SHR肾损伤大鼠肠道菌群丰度、多样性及组成结构的改变,同时又可引起肠道菌群代谢产物SCFAs水平的升高,推测PA对高血压性肾损害的治疗作用可能与调节肠道菌群有关,但详细机制有待进一步深入研究。
戴亮亮[5]（2018）在《纳米介孔硅及聚合物胶束智能药物递送系统制备与抗肿瘤效应研究》文中研究指明恶性肿瘤是威胁人类健康和生命的重大疾病之一。传统临床手术、放疗及化疗治疗手段仍存在诸多缺陷,如易复发、无靶向特异性、多药耐药性及严重毒副作用等,因而较难彻底根治肿瘤,尤其对晚期肿瘤疗效甚微。纳米颗粒药物载体由于其独特的增强渗透性和滞留性（EPR）效应,在提高抗肿瘤药物生物利用率、增强疗效以及减少毒副作用方面发挥着重要作用,有广阔的临床应用前景。目前,已开发出基于脂质体、无机纳米颗粒和聚合物胶束的多种抗肿瘤纳米医药制剂。智能药物递送系统就是其中的佼佼者,该体系可以选择性的将治疗药物靶向递送到肿瘤病灶,原位响应生物信号刺激释放化疗药物/光敏剂/siRNA。兼顾生物相容性的前提下,智能药物递送系统能够对肿瘤高效地杀伤且毒副作用小,在临床上有巨大的应用前景。智能药物递送系统一般是以纳米颗粒为药物载体,通过多功能修饰手段整合诸如刺激响应性释放机制以及靶向分子等策略来构建。介孔硅纳米颗粒以及聚合物胶束作为其中的典型代表,受到了研究人员的广泛关注。介孔硅纳米颗粒具有合成简单、高比表面积、粒径可调和易修饰等特点,作为纳米储存器被广泛开发及应用到药物递送和生物成像等医学领域。聚合物胶束由于其良好的生物相容性、低免疫原性、高药物装载量以及可降解等优点,在靶向递送药物/基因治疗肿瘤等方面有巨大的应用前景。但仍存在一些亟待解决的问题:1.如何构建有高载药量和良好生物相容性的生物信号响应性介孔硅靶向药物递送系统,使其特异性的靶向肿瘤病灶,在肿瘤微环境特有生物信号的刺激下,原位递送化疗药物特异性地杀伤肿瘤,在提高药物利用率的同时减少对正常组织的副作用;2.如何设计构建有良好生物相容性和刺激响应性的可降解聚合物胶束靶向药物递送系统,实现对肿瘤的特异性靶向及提高肿瘤细胞对载体的摄取效率,使其被摄取后能够有效地从溶酶体逃逸到胞浆,并且响应性的触发载体降解和化疗药物/功能性治疗分子的释放机制,对肿瘤组织高效杀伤。基于以上问题,本文设计合成了三种纳米介孔硅及三种可降解聚合物胶束,通过多功能化修饰手段整合生物信号刺激响应性释放/降解机制以及引入肿瘤靶向基元,共构建了六种硅纳米颗粒/聚合物胶束药物递送系统,较系统地研究了各体系体内外刺激响应性药物释放特性、细胞靶向、生物成像、免疫响应、肿瘤抑制及相关分子机制,为研发靶向药物递送系统提供科学依据。本文的主要研究内容和结论如下:一、基于纳米介孔硅颗粒响应性药物递送系统的构建及抗肿瘤研究1.还原响应性介孔硅/肝素药物递送系统构建及抗肝肿瘤评价本章构建了以MSN为纳米储存器,二硫键为分子开关、肝素作为纳米塞、乳糖酸作为靶向基元的还原响应性靶向药物递送系统（MSNs-S-S-HP-LA）。透射电镜、热重、Zeta电位、红外光谱和比表面及孔隙度表征证实已成功构建MSNs-S-S-HP-LA靶向药物递送系统。药物控释实验证实该体系有还原敏感的控释特性。细胞毒性实验表明该体系有良好的生物相容性。激光共聚焦、流式细胞仪、细胞透射及凝胶电泳DNA片段测定实验表明该靶向药物递送系统可以被肝肿瘤细胞HepG2特异性识别并摄取。在肿瘤细胞内高浓度GSH的刺激下,释放装载的抗肿瘤药物阿霉素DOX,有效地杀伤肿瘤细胞。体内实验证实该体系可以有效抑制肿瘤生长并减少化疗药物的毒副作用。2.pH响应性枝状介孔硅药物递送系统构建及抗肝肿瘤、生物成像评价基于MNS功能单一的问题,本章以有多级孔结构的枝状介孔硅纳米颗粒（HPSN）为纳米载体,有荧光性质的N,N-亚苯基双（亚水杨基亚胺）二羧酸（Salphdc）与铟离子二者形成的共价聚合物为有机大分子纳米塞,叶酸作为靶向分子,构建了有生物成像和肿瘤靶向功能的pH响应性药物递送系统（HPSN-Salphdc-FA）。透射电镜、扫描电镜、动态光散射光谱、Zeta电位、核磁光谱及红外光谱等诸多表征数据表明已经成功构建了HPSN-Salphdc-FA药物递送系统。药物释放实验表明该体系有pH敏感的控释特性。激光共聚焦、吞噬机制、细胞透射电镜以及流式实验证实肝肿瘤细胞通过受体介导的方式特异性地胞吞HPSN-Salphdc-FA,该体系能响应性释放DOX杀伤肝肿瘤细胞且有剂量依赖的细胞毒性。体内实验表明该体系能有效地抑制肿瘤生长且对正常组织无明显副作用,同时该系统有良好的生物成像功能。3.pH响应性中空介孔硅/透明质酸药物递送系统构建及抗肝肿瘤评价为提高MSN药物递送系统的载药量,本章以中空介孔硅纳米颗粒（HMSNs）为药物载体,腙键为递送开关,透明质酸为纳米塞及靶向分子,构建了pH响应性中空介孔硅/透明质酸靶向药物递送系统（HMSNs-PA-HA）。透射电镜、扫描电镜、核磁/红外光谱、热重以及Zeta电位分析均表明已成功构建HMSNs-PA-HA靶向药物递送系统。药物释放实验表明该体系有良好的封装特性和pH敏感的控释特性。激光共聚焦、流式细胞仪、细胞活性以及细胞透射电镜结果证实肝肿瘤细胞通过CD44介导的胞吞路径对该靶向药物递送系统高效摄取,该体系能响应胞内低酸刺激快速释放DOX杀伤肝肿瘤细胞且有剂量依赖的细胞毒性。体内实验证实该体系能主动靶向肿瘤组织,有效地抑制肿瘤生长且有良好生物相容性。二、基于可降解聚合物胶束响应性药物递送系统的构建及抗肿瘤研究1.ROS响应性聚合物胶束药物递送系统的构建及在光动力-化药联合治疗肝肿瘤中的应用本章以聚硫化丙烯为疏水段,PEG为亲水段,叶酸为肿瘤靶向分子,构建了有肿瘤靶向和可降解性能的ROS响应性胶束药物递送系统（PPS-mPEG-Ser-FA）。核磁光谱、凝胶渗透色谱、质谱及透射电镜分析表明PPS-mPEG-Ser-FA嵌段聚合物已逐步成功合成且制备胶束颗粒有适宜的尺寸（80 nm）、低的临界胶束浓度及良好的稳定性。透射电镜、动态光散射分析、核磁光谱以及释放实验证实PPS-mPEG-Ser-FA@DOX@ZNPC胶束有ROS敏感的可降解及控释特性。激光共聚焦、流式细胞仪、细胞活性以及蛋白电泳分析结果表明肝肿瘤细胞通过受体介导的路径特异性地摄取该复合胶束,载药胶束能响应胞内ROS刺激降解并释放药物,诱导肿瘤细胞凋亡。另外,激光照射能有效地产生ROS,加速胶束降解及增强肿瘤细胞凋亡。体内实验结果表明该体系能主动靶向肿瘤,通过光动力-化药联合治疗显着地抑制肿瘤生长且无明显副作用,同时有效地延长了荷瘤裸鼠的存活时间。2.双靶向级联响应性前药胶束药物递送系统的构建及在光动力-化药联合治疗宫颈癌中的应用本章构建了双靶向级联响应性聚合物胶束药物递送系统（FA-PEG-PDBO-BPT）,该体系由二硫键连接的喜树碱前药,有质子化功能的多叔胺聚合物PDEA,双亲分子PEG以及靶向分子叶酸构成。本研究还合成了一种线粒体靶向光敏剂MTPP,使其负载到药物递送系统。核磁光谱、质谱、凝胶渗透色谱、高效液相色谱、透射电镜结果表明FA-PEG-PDBO-BPT聚合物和MTPP已逐步成功合成且制备的胶束有适宜尺寸,良好稳定性以及较低临界胶束浓度。透射电镜、核磁光谱以及药物释放实验证实该体系有pH响应性质子化,还原响应性CPT前药释放,级联响应性胶束降解及药物释放特性。激光共聚焦、流式细胞仪、凋亡检测分析表明该体系被宫颈癌细胞通过受体介导的胞吞机制高效摄取,载药胶束能响应胞内低酸和GSH刺激触发溶酶体逃逸,响应性降解和释放药物。释放的MTPP能够靶向线粒体,利用PDT诱导线粒体损伤且激活其介导的凋亡通路,同CPT共同作用高效杀伤肿瘤。体内实验结果表明该体系能主动肿瘤,提高CPT的生物利用度,通过光动力-化药联合治疗显着地抑制肿瘤生长、减少CPT副作用、延长小鼠存活时间,有良好的抗肿瘤作用。3.pH响应性尺寸/电荷可调胶束的构建及在光动力-PD-L1免疫联合治疗黑色素瘤中的应用本章制备了pH响应性尺寸/电荷可调的胶束药物递送系统,使其负载PD-L1干扰RNA（siPD-L1）和MTPP,通过抑制免疫逃逸和激活免疫应答的方式介导增强肿瘤免疫治疗。该复合胶束由两条嵌段聚合物PEG-CDM-PDEA和PEI-PDEA以1.5:1比例制备而成。核磁光谱、凝胶渗透色谱以及透射电镜结果表明两条嵌段聚合物已逐步成功合成且制备的复合胶束有适宜尺寸,良好稳定性以及较低临界胶束浓度。透射电镜、核磁光谱以及药物释放实验证实该体系有pH响应性尺寸减小,正电荷增加,胶束降解及药物释放特性。激光共聚焦、流式细胞仪、凋亡检测分析表明该体系能增强肿瘤渗透,提高细胞摄取,响应胞内低酸刺激触发溶酶体逃逸,响应性降解和释放药物,释放的siRNA和MTPP能高效沉默PD-L1表达且杀伤肿瘤细胞。体内实验结果表明该体系通过光动力-PD-L1免疫联合治疗既能抑制PD-L1介导的免疫耐受,又能激活抗肿瘤免疫应答,二者共同作用诱导机体免疫系统高效杀伤肿瘤并抑制肿瘤转移。
杨柳,郭海云,邵长健,朱凯龙,张伟东,才延辉,李燕[6]（2018）在《糖原检测方法研究进展》文中提出糖原是由葡萄糖分子通过糖苷键聚合而成的高分子物质,作为重要的能源物质储存于肝脏、肌肉和脑等重要器官。糖原的储存或代谢异常可引起多种疾病。一方面,作为一种动态能量底物,准确检测糖原的质与量有一定难度,另一方面,目前随着对糖原研究的深入,出现了越来越多的糖原检测方法和手段。因此,选择恰当的糖原检测方法以促进对糖原的研究显得尤为重要。本文对几种常用的糖原定性与定量检测方法的实验原理,操作步骤及影响因素和改进进行总结,比较其优缺点,为研究者选择最适合的方法对糖原代谢及相关疾病进行研究提供参考。
张渊[7]（2014）在《900MHz电磁辐照对大鼠脑损伤及神经行为学改变研究》文中进行了进一步梳理前言：目前手机已经成为人们日常生活中不可缺少的基本工具，手机辐照是否会对人体造成影响，会造成何种影响，其影响机制如何，有何防护手段等问题也被人们时常提及却还未得到根本解决。目前也有较多关于手机辐照对机体影响的研究，但各个实验室之间实验结果差别较大，因此需要对手机射频电磁场的生物学效应做进一步研究。目的：本实验主要探索手机辐照对大鼠空间学习记忆能力、脑组织超微结构和对血脑屏障通透性等的影响，并对结果进行综合分析探讨指标的相互联系，增加实验的说服性。方法：采用工作频率为900MHz，功率密度为1mW/cm2的射频电磁场发生仪，来模拟市面上最常用的移动电话的使用环境。将48只成年雄性SD大鼠随机分为辐照组和假辐照组两个大组，每个大组又由实验14天及实验28天将动物随机分为两个小组，每个小组共12只大鼠。实验大鼠在柔性大鼠固定器下每天接受辐照或假辐照3小时。完成辐照或假辐照后，分别采用Morris水迷宫实验测量每组大鼠空间学习记忆能力变化、透射电镜观察大鼠脑组织超微结构改变，并使用脑组织血浆白蛋白渗出来评价血脑屏障通透性变化，以及应用HO-1免疫组化染色来反映大鼠脑组织氧化应激水平。结果：Morris水迷宫实验空间探索阶段，辐照28天组大鼠平台所在位置的穿越次数明显减少，通过目标象限时间的百分比和路程百分比也明显低于其他各组大鼠。透射电镜下见辐照组大鼠脑组织皮层和海马区出现明显的神经元损伤以及血管结构受损。脑组织白蛋白免疫组化染色和HO-1免疫组化染色也发现辐照组大鼠脑组织出现大量阳性表达，其中尤以辐照28天组更为明显。结论：手机所产生的射频电磁场辐照可以造成大鼠空间学习记忆能力明显下降，脑组织超微结构破坏，引起脑内氧化应激水平的增高。以上改变可能与手机辐照造成的血脑屏障通透性增高有关。
刘燕青[8]（2013）在《HCN4在微波辐射致大鼠窦房结损伤中的作用研究》文中认为目的和意义：随着微波技术的飞速发展和信息时代的来临，人们在享受便捷生活的同时，也面临着微波污染的危害。此外，微波技术在军事上的应用发展迅速，它不仅能严重破坏敌方电子设备，同时也能造成机体损伤。心脏传导系统是微波辐射敏感的靶标之一，SAN是心脏传导系统最重要的组成部分。然微波辐射致SAN损伤规律及量效关系未明，其致伤机制尚未见报道。HCN4可调控P细胞的起搏电流及维持其电生理功能。SAN组织中HCN4的异常表达可能是各种SAN病变发生的分子基础之一，而HCN4及其调控可能在微波辐射致大鼠SAN损伤中发挥重要作用。因此，研究微波辐射致SAN损伤中HCN4的改变、调控及其意义，将为深入研究微波辐射致心脏损伤的分子机制和防治措施提供新靶标和思路，为寻找敏感诊断指标和制定防护标准提供实验依据。材料和方法：（1）大鼠SAN定位及组织结构观察：采用二级Wistar成年大鼠20只，对右心房及与之相连的近段上腔静脉做水平连续切片，对切片行HE、Masson染色，光镜下观察连续切片，定位SAN并观察组织结构。（2）大鼠SAN超微结构观察：采用二级雄性Wistar成年大鼠10只，依据SAN位置、组织结构特点分两步取材，经树脂定向包埋，半薄切片甲苯胺蓝预染，光镜下定位后，再行超薄切片，透射电镜观察SAN超微结构。（3）微波辐射对大鼠SAN功能和结构的影响研究：采用平均功率密度为0、5、10、50mW/cm2的脉冲微波辐射160只二级雄性Wistar大鼠，辐射时间为6min，于辐射前、辐射后即刻、7d、14d、28d、3m、6m和9m，采用多道生理记录仪检测大鼠ECG的变化；于辐射后1d、7d、14d、28d、3m、6m、9m、12m，采用光镜和电镜观察大鼠SAN组织结构和超微结构变化；采用Masson染色、天狼猩红染色和图像分析技术，观察SAN组织胶原纤维含量的动态变化规律。（4）微波辐射后大鼠SAN组织HCN4改变及其调控机制研究：采用ISH、IHC和图像分析等方法，检测50mW/m2微波辐射后大鼠SAN组织中HCN4及其上游分子β1-AR、M2-AchR基因和/或蛋白的表达变化。（5）微波辐射对原代培养乳鼠SAN细胞的损伤效应及机制研究：以体外原代培养的SAN细胞为研究对象，采用倒置显微镜、AFM、LSCM、IF等技术，观察微波辐射对细胞形态结构、搏动特征、细胞膜结构、细胞内[Ca2+]及HCN4表达的影响。结果：（1）正常成年大鼠SAN位置和组织学特点：正常成年大鼠SAN位于上腔静脉与右心耳交界区及其以上的上腔静脉壁内，呈马蹄形/C形；大鼠SAN组织结构疏松，主要含有P细胞、T细胞和少量心房肌细胞，间质胶原纤维含量丰富。（2）正常成年大鼠SAN超微结构观察：甲苯胺蓝预染半薄切片的方法简便迅速，着色效果好，可有效缩短定位时间。电镜观察显示，大鼠SAN内主要含有两种细胞。①P细胞：胞体小，胞浆丰富，细胞器含量少；肌原纤维含量少，杂乱分布于细胞膜附近，几乎不含肌节；②T细胞：胞体较P细胞大，细胞器含量较多，肌原纤维可见明显肌节，常沿细胞纵轴排列，分布于细胞膜附近。（3）微波辐射对大鼠SAN功能的影响：5mW/cm2组未见明显异常；10和50mW/cm2微波辐射后大鼠SAN功能受损，主要表现为：心率呈先加快后减慢趋势；P波振幅降低；ECG出现窦性心律不齐、SAN内游走性心律和房性心律失常等。（4）微波辐射后大鼠SAN组织结构变化：5mW/cm2组未见明显异常；10和50mW/cm2微波辐射后1d，表现为P、T细胞水肿；T细胞排列呈波浪状改变；14～28d损伤最重，表现为细胞排列紊乱，部分细胞胞浆嗜酸性染色增强，核固缩深染；3m～6m损伤减轻呈恢复趋势，仍有部分细胞呈水肿状态；9m～12m表现为实质细胞减少，间质胶原纤维增多及脂肪浸润。以上改变尤以50mW/cm2组最为显着。（5）微波辐射后大鼠SAN超微结构变化：5mW/cm2组未见明显异常；10和50mW/cm2微波辐射后1d～28d表现为P、T细胞线粒体最早受累，出现肿胀，嵴断裂，甚至空化；肌原纤维局灶性溶解、断裂；可见P、T细胞核染色质浓缩、边集；细胞膜小凹减少或消失；血管周围间隙增宽、水肿；6m～12m表现为实质细胞退行性变，间质胶原原纤维增多、脂肪浸润。以上改变尤以50mW/cm2组最为显着。（6）微波辐射致大鼠SAN损伤后HCN4、β1-AR、M2-AchR变化：50mW/cm2微波辐射后1d～28d，大鼠SAN组织中HCN4mRNA表达上调（P<0.05或P<0.01），3m表达下调（P<0.05）；HCN4蛋白于辐射后1d～28d表达增加（P<0.05或P<0.01），3m～6m表达降低（P<0.05）；β1-AR mRNA于辐射后1d～3m表达上调（P<0.05或P<0.01）；β1-AR蛋白于辐射后1d～3m表达增加（P<0.05或P<0.01）；M2-AchR蛋白于辐射后1d～6m表达增加（P<0.05或P<0.01）。（7）微波辐射后体外培养SAN细胞形态结构、搏动特征变化：正常SAN细胞呈长梭形，伸出伪足或突起与周围细胞连接成片，呈单个细胞搏动，搏动速度快，节律规则。10和50mW/cm2微波辐射后，SAN细胞搏动明显减慢且节律不规则，细胞肿胀变圆，伪足和突起减少。50mW/cm2微波辐射后即刻SAN细胞内[Ca2+]升高（P<0.05），细胞膜表面可见穿孔现象。（8）微波辐射致体外培养SAN细胞损伤后HCN4表达改变：50mW/cm2微波辐射后即刻，SAN细胞中HCN4蛋白表达显着减弱（P＜0.01），12h表达显着增强（P＜0.05）。结论：（1）成年大鼠SAN特殊的位置提示：大鼠SAN取材时一定要保留上腔静脉近心段；两步法前固定取材有助于大鼠SAN电镜标本的制作。（2）10、50mW/cm2微波辐射导致大鼠SAN功能障碍、组织结构和超微结构损伤，上述改变与微波辐射剂量呈正相关。（3）10、50mW/cm2微波辐射可导致培养的SAN细胞形态结构损伤和搏动下降，且与微波辐射剂量呈正相关。（4）HCN4异常表达可能是微波辐射致SAN损伤的重要致伤分子之一。（5）SAN组织β1-AR高表达可能通过促进HCN4表达加重微波辐射后SAN组织损伤过程；M2-AchR高表达可能通过抑制HCN4表达促进微波辐射致SAN损伤后的修复过程。（6）细胞膜穿孔、细胞内钙超载、HCN4的高表达是微波辐射致SAN损伤的重要机制。
侯勇[9]（2013）在《鸡法氏囊发育形态学研究》文中进行了进一步梳理法氏囊（bursa of Fabricius,BF）是鸟类特有的免疫器官,它是B淋巴细胞发育、分化和成熟的场所,发育成熟的B淋巴细胞从法氏囊迁移到外周淋巴器官中进行定居、繁衍,并执行重要的免疫功能。幼龄鸡法氏囊易受感染而受损,甚至发生萎缩,引起免疫抑制,给养鸡生产带来巨大经济损失。因此,研究鸡法氏囊发育的调控机理,对疾病的预防和诊断具有非常重要的现实意义。本课题拟对不同日龄鸡法氏囊形态结构、法氏囊内多糖物质、肥大细胞和Toll样受体4（Toll like receptor4, TLR4）的变化规律进行研究,从形态学角度探讨鸡法氏囊发育规律,主要研究内容和结果如下：1鸡法氏囊形态结构发育变化规律本课题采用HE染色技术对不同日龄鸡法氏囊的形态结构进行了研究,结果显示：随着日龄的增长,法氏囊不断完善自身结构,细胞排列更加紧密,淋巴滤泡逐渐增大,淋巴细胞增多,1日龄法氏囊形成约4-5条细长的黏膜皱襞,黏膜下层较薄,呈疏松的空网状；肌层内平滑肌细胞数量较少,浆膜较薄；7日龄法氏囊淋巴结内皮质髓质分界清晰,滤泡数量显着增大增多；21日龄到35日龄,滤泡由多边形逐渐转变成长方形；在42日龄时,黏膜上皮细胞逐渐增多,排列紧密,细胞核紧密排列成直线位于上皮基底部。这一研究表明,随着日龄的增长鸡法氏囊逐渐发育完善。2鸡法氏囊内多糖物质发育变化规律本课题采用PAS染色技术对不同日龄鸡法氏囊内多糖物质的变化规律进行了研究,结果显示：多糖物质在法氏囊中存在大量表达,且主要分布黏膜层的上皮和固有层中,皮质和髓质都很少分布,随着日龄的增长,法氏囊黏膜层阳性细胞更加明显,上皮和固有层多糖物质更多,淋巴小结含量较少,数据统计结果表明,与其它日龄相比,多糖物质的面积以及积分光密度值在42日龄时差异显着（P<0.05）,这一研究表明,经PAS染色后,法氏囊的黏膜层中含有较多的多糖物质,可能黏膜层与外界接触较多,相应淋巴细胞的代谢、生长和增殖较快,有利于抵御外界病原微生物。3鸡法氏囊内肥大细胞发育变化规律本课题采用甲苯胺蓝染色技术对不同日龄鸡法氏囊内肥大细胞的变化规律进行了研究,结果显示；肥大细胞在法氏囊中有大量表达,且主要分布于黏膜上皮及淋巴滤泡周围的结缔组织中,随着日龄的增长,在黏膜层的表达量随日龄增加有逐渐增强的趋势,而在固有层及黏膜下层则有先增加后减少的趋势。21日龄后,肥大细胞则集中表达于黏膜层中,皮、髓质一般无肥大细胞分布。数据统计结果表明,与其它日龄相比,肥大细胞数量、面积以及光密度值在42日龄时差异显着（P<0.05）,这一研究表明：法氏囊的肥大细胞大多分布于法氏囊浅层的黏膜上皮下方、固有层等与抗原易接触的部位,而黏膜下层的结缔组织中肥大细胞很少,肌层和浆膜少有分布。4鸡法氏囊内TLR4发育变化规律本课题采用免疫组织化学染色技术对不同日龄鸡法氏囊内TLR4的变化规律进行了研究,结果显示：TLR4在整个法氏囊内都有表达,主要分布于黏膜层和黏膜下层,尤其是黏膜下层的淋巴小结,随着日龄的增长,TLR4在囊内的表达有先升高后下降的趋势,基本上是在1到35天TLR4的表达量随日龄增加而上升,而在42日龄时表达量有显着下降的趋势。数据统计结果表明,与其它日龄相比,TLR4阳性细胞数量以及积分光密度值在35日龄时差异最显着（P<0.05）,这一研究表明,免疫因子TLR4在不同日龄的法氏囊中表现出一定的规律性,其表达强度也与法氏囊的发育呈现一定的时间相关性,提示天然免疫因子TLR4在法氏囊的前期生长发育中起到了非常重要的作用。
田澄,金玉兰,赵晓丽,刘红刚[10]（2011）在《微波辐射PAS染色显示声带鳞状细胞癌早期的基底膜改变》文中指出目的观察微波辐射PAS染色法显示声带鳞状细胞癌早期基底膜改变的效果。方法对89例声带早期鳞状细胞癌改变的病理切片进行微波辐射PAS染色和传统PAS染色,比较两者显示基底膜的效果,并通过层黏连蛋白的免疫组化EnVision二步法对两种PAS染色结果进行验证。结果两种PAS染色结果与层黏连蛋白的染色结果一致。HE染色怀疑有微小浸润者52例,其中PAS染色显示43例可疑微浸润灶周边基底膜样物质消失或部分缺失,证实有微浸润;9例疑似微浸润灶周边有完整的基底膜着色,证实为上皮脚横切或斜切面造成的假象。另外,微波辐射PAS染色时间为15 min,传统PAS染色时间为56 min,微波辐射PAS染色显示基底膜较传统PAS染色清晰（P<0.001）。结论微波辐射PAS染色显示声带鳞状细胞癌早期改变基底膜的结果可靠,并可显着缩短显示时间,提高传统PAS染色显示基底膜的效果。
二、微波辐射在PAS组化染色中的应用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、微波辐射在PAS组化染色中的应用（论文提纲范文）
（1）肺癌的氟-19磁共振/荧光/光声多模态影像研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 引言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 核磁共振成像 |
| 1.2.1 核磁共振成像基础 |
| 1.2.2 基于~1H核磁共振造影剂 |
| 1.2.3 基于~(19)F核磁共振造影剂 |
| 1.2.4 ~(19)F核磁共振探针在生物医学影像学中的应用 |
| 1.3 多模态分子影像学 |
| 1.3.1 荧光成像 |
| 1.3.2 光声成像 |
| 1.3.3 多模态成像 |
| 1.4 硅量子点 |
| 1.4.1 硅量子点概述 |
| 1.4.2 硅量子点的制备 |
| 1.4.3 硅量子点在生物医学影像学中的应用 |
| 1.5 细胞膜仿生纳米颗粒 |
| 1.5.1 被动靶向和主动靶向 |
| 1.5.2 细胞膜仿生纳米颗粒在肿瘤靶向诊疗中的应用 |
| 1.6 立题背景和主要研究内容 |
| 第2章 氟化硅纳米颗粒用于肿瘤细胞的~(19)F_MRI/荧光双模态成像 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 试剂与仪器 |
| 2.2.2 氟化硅纳米颗粒(~(19)FSiNPs)的制备 |
| 2.2.3 ~(19)FSiNPs偶联RGD环肽 |
| 2.2.4 ~(19)SiNPs的荧光量子产率 |
| 2.2.5 ~(19)FSiNPs的稳定性 |
| 2.2.6 ~(19)FSiNPs的核磁性质 |
| 2.2.7 ~(19)FSiNPs的细胞荧光共聚焦实验 |
| 2.2.8 ~(19)FSiNPs的细胞~(19)F-MRI实验 |
| 2.2.9 MTT法测细胞存活率 |
| 2.2.10 肺腺癌移植瘤模型鼠建立 |
| 2.2.11 ~(19)FSiNPs的活体~(19)F-MRI和荧光双模态成像 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 ~(19)FSiNPs的形貌和元素表征 |
| 2.3.2 ~(19)FSiNPs的稳定性 |
| 2.3.3 ~(19)FSiNPs的荧光和核磁性质 |
| 2.3.4 ~(19)FSiNPs-RGD性质表征 |
| 2.3.5 ~(19)FSiNPs-RGD的细胞靶向性 |
| 2.3.6 ~(19)FSiNPs的活体~(19)F-MRI和荧光双模态成像 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 细胞膜仿生的~(19)F-MR/荧光/光声多模态探针的构建及其体外性质研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 试剂与仪器 |
| 3.2.2 细胞膜仿生纳米颗粒(AM-PPNPs)的制备及表征 |
| 3.2.3 AM-PP@ICGNPs的光热效应 |
| 3.2.4 SDS-PAGE测定细胞膜蛋白 |
| 3.2.5 细胞摄取实验测定AM-PPNPs核壳结构稳定性 |
| 3.2.6 AM-PPNPs的细胞荧光共聚焦实验 |
| 3.2.7 AM-PPNPs的细胞~(19)F-MRI实验 |
| 3.2.8 细胞光热毒性实验 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 AM-PPNPs的形貌表征 |
| 3.3.2 AM-PP@ICGNPs的光热效应 |
| 3.3.3 AM-PPNPs的核磁性质 |
| 3.3.4 AM-PPNPs的细胞靶向性 |
| 3.3.5 AM-PPNPs核壳结构稳定性 |
| 3.3.6 AM-PP@ICGNPs的细胞光热毒性 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 细胞膜仿生的~(19)F-MR/荧光/光声多模态探针在肺癌诊疗中的应用研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 试剂与仪器 |
| 4.2.2 AM-PP@ICGNPs体内血液循环测试 |
| 4.2.3 裸鼠的A549肿瘤造模 |
| 4.2.4 AM-PP@ICGNPs的活体荧光成像 |
| 4.2.5 AM-PP@ICGNPs的活体光声成像 |
| 4.2.6 AM-PP@ICGNPs的活体~(19)F-MRI成像 |
| 4.2.7 AM-PP@ICGNPs的活体肿瘤光热效应 |
| 4.2.8 AM-PP@ICGNPs的活体肿瘤光热治疗 |
| 4.2.9 AM-PP@ICGNPs的活体毒性研究 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 AM-PP@ICGNPs的活体荧光/光声/~(19)F-MRI成像 |
| 4.3.2 AM-PP@ICGNPs的活体肿瘤光热治疗 |
| 4.3.3 AM-PP@ICGNPs的活体毒性研究 |
| 4.4. 本章小结 |
| 第5章 总结与展望 |
| 5.1 全文总结 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 |
（2）粒毛盘菌多糖抗肿瘤作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 真菌多糖的提取 |
| 1.2 真菌多糖的纯化 |
| 1.3 真菌多糖的分级分离 |
| 1.4 真菌多糖的纯度及分子量的测定 |
| 1.5 真菌多糖的生物活性 |
| 1.6 粒毛盘菌多糖研究概况 |
| 1.7 本课题研究的内容与意义 |
| 第二章 粒毛盘菌YM130胞外多糖联合5-氟尿嘧啶体外抗肝癌作用及其机制 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 材料 |
| 2.2.2 主要试剂和仪器 |
| 2.2.3 细胞培养 |
| 2.2.4 细胞毒性实验 |
| 2.2.5 细胞形态学观察 |
| 2.2.6 克隆形成实验 |
| 2.2.7 伤口愈合实验 |
| 2.2.8 细胞侵袭与迁移实验 |
| 2.2.9 细胞核形态学分析 |
| 2.2.10 Western blot分析以及核蛋白和胞质蛋白提取方法 |
| 2.2.11 细胞凋亡检测 |
| 2.2.12 细胞中活性氧的检测 |
| 2.2.13 细胞周期分析 |
| 2.2.14 细胞线粒体膜电位测定 |
| 2.2.15 细胞免疫荧光染色 |
| 2.2.16 数据统计与分析 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 5-FU和LEP130分别对Hep G2、LO2和HSF细胞活力的影响 |
| 2.3.2 5-FU与LEP130联用对Hep G2细胞的协同抑制作用 |
| 2.3.3 5-FU与LEP130联用对Hep G2细胞凋亡的影响 |
| 2.3.4 LEP130细胞存活途径的影响 |
| 2.3.5 LEP130对细胞内活性和抗氧化酶的影响 |
| 2.3.6 LEP130对线粒体凋亡途径的影响 |
| 2.3.7 5-FU与LEP130联用对Hep G2细胞周期的影响 |
| 2.3.8 5-FU与LEP130对p53活化状态和DNA修复的影响 |
| 2.3.9 5-FU与LEP130联用Hep G2细胞迁移与侵袭 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 粒毛盘菌YM130胞外多糖联合环磷酰胺体内抗肝癌作用及其机制 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 材料 |
| 3.2.2 主要试剂和仪器 |
| 3.2.3 细胞培养 |
| 3.2.4 H22荷瘤小鼠模型 |
| 3.2.5 动物分组与处理 |
| 3.2.6 生化指标分析 |
| 3.2.7 组织病理学检测 |
| 3.2.8 免疫组化检测 |
| 3.2.9 Western blot分析 |
| 3.2.10 TUNEL染色 |
| 3.2.11 线粒体膜电位检测 |
| 3.2.12 数据统计与分析 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 CTX与LEP130联用对H22 荷瘤小鼠肿瘤生长的影响 |
| 3.3.2 CTX与LEP130联用对H22 荷瘤小鼠肿瘤组织形态的影响 |
| 3.3.3 CTX与LEP130联用对肿瘤细胞死亡受体途径的影响 |
| 3.3.4 CTX与LEP130联用对肿瘤细胞线粒体凋亡途径的影响 |
| 3.3.5 CTX与LEP130联用对H22 荷瘤小鼠免疫系统的影响 |
| 3.3.6 CTX与LEP130联用对肿瘤组织中免疫细胞和免疫因子的影响 |
| 3.3.7 CTX与LEP130联用对肿瘤组织中存活蛋白的影响 |
| 3.3.8 CTX与LEP130联用对肿瘤组织中血管生成的影响 |
| 3.3.9 LEP130对CTX引起的副作用的影响 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 粒毛盘菌YM130胞外多糖通过增强机体免疫系统抑制S180荷瘤小鼠肿瘤生长 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 材料 |
| 4.2.2 主要试剂和仪器 |
| 4.2.3 细胞培养 |
| 4.2.4 细胞毒性实验 |
| 4.2.5 S180荷瘤小鼠模型 |
| 4.2.6 动物分组与处理 |
| 4.2.7 生化指标分析 |
| 4.2.8 组织病理学检测 |
| 4.2.9 免疫组化检测 |
| 4.2.10 Western blot分析 |
| 4.2.11 免疫荧光双染实验 |
| 4.2.12 Quantitative real-time PCR(q PCR)检测 |
| 4.2.13 小鼠腹腔巨噬细胞(M?)的制备及条件培养基处理 |
| 4.2.14 数据统计与分析 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 LEP130对S180荷瘤小鼠肿瘤生长的影响 |
| 4.3.2 LEP130对肿瘤微环境中M1、M2型巨噬细胞的影响 |
| 4.3.3 LEP130通过T细胞调节肿瘤微环境中的M1、M2型巨噬细胞的比率 |
| 4.3.4 LEP130对肿瘤特异性辅助性T细胞(Th1)免疫应答的影响 |
| 4.3.5 LEP130对免疫抑制性肿瘤微环境的影响 |
| 4.3.6 LEP130在体外通过TLR4模式识别受体促进原代巨噬细胞向M1 型极化 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 粒毛盘菌YM130胞外多糖抗结肠癌活性与肠道微生物及其代谢物相关性 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 材料 |
| 5.2.2 主要试剂和仪器 |
| 5.2.3 CRC小鼠建模与处理 |
| 5.2.4 生化指标分析 |
| 5.2.5 组织病理学检测 |
| 5.2.6 免疫组化检测 |
| 5.2.7 Western blot分析 |
| 5.2.8 粪便中短链脂肪酸的测定 |
| 5.2.9 DNA提取和16S r RNA测序 |
| 5.2.10 测序数据的处理与生物信息学分析 |
| 5.2.11 非靶向代谢组学检测 |
| 5.2.12 代谢组学数据分析 |
| 5.2.13 数据统计与分析 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 LEP130对AOM/DSS诱导的小鼠结肠癌发生的影响 |
| 5.3.2 LEP130对结肠癌小鼠肠屏障完整性和肠道炎症的影响 |
| 5.3.3 LEP130对结肠癌小鼠肠道菌群整体结构的影响 |
| 5.3.4 LEP130对结肠癌小鼠肠道菌群组成的影响 |
| 5.3.5 LEP130对结肠癌小鼠肠道菌群相关性的影响 |
| 5.3.6 LEP130对结肠癌小鼠代谢组的影响 |
| 5.3.7 LEP130对结肠癌小鼠差异代谢物与肠道菌群相关性的影响 |
| 5.4 本章小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间的学术活动及成果情况 |
（3）功能化金属有机框架纳米材料在肿瘤诊疗中的应用（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩写清单 |
| 1 引言 |
| 2 文献综述 |
| 2.1 肿瘤与纳米药物 |
| 2.2 MOFs在肿瘤治疗中的应用 |
| 2.2.1 MOFs在化学治疗中的应用 |
| 2.2.2 MOFs在光动力治疗中的应用 |
| 2.2.3 MOFs在光热治疗中的应用 |
| 2.2.4 MOFs在免疫治疗中的应用 |
| 2.3 MOFs在肿瘤诊断中的应用 |
| 2.3.1 MOFs在生物分子检测中的应用 |
| 2.3.2 MOFs在肿瘤影像学诊断中的应用 |
| 2.4 MOFs在肿瘤诊疗一体化中的应用 |
| 2.5 本论文主要研究内容 |
| 3 金属-有机框架纳米梭用于肿瘤的光动力和低温光热协同治疗 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 材料与试剂 |
| 3.2.2 仪器设备 |
| 3.2.3 Me_4TBP的制备 |
| 3.2.4 Me_4TBP-Fe的制备 |
| 3.2.5 H_4TBP-Fe的制备 |
| 3.2.6 Zr-FeP纳米梭的制备 |
| 3.2.7 siRNA/Zr-FeP MOF纳米体系的构建 |
| 3.2.8 siRNA/Zr-FeP MOF的体外光热性能研究 |
| 3.2.9 siRNA/Zr-FeP MOF的体外ROS生成能力测定 |
| 3.2.10 细胞培养 |
| 3.2.11 材料的细胞毒性试验 |
| 3.2.12 体外治疗 |
| 3.2.13 建立小鼠模型 |
| 3.2.14 荷瘤小鼠PTI/CT/PAI |
| 3.2.15 活体治疗效果评估 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 siRNA/Zr-FeP MOF的制备与表征 |
| 3.3.2 siRNA/Zr-FeP MOF体外光热性能的研究 |
| 3.3.3 siRNA/Zr-FeP MOF的体外ROS生成测定 |
| 3.3.4 siRNA/Zr-FeP MOF的药物递送以及Hsp70性能的研究 |
| 3.3.5 siRNA/Zr-FeP MOF治疗效率的研究 |
| 3.3.6 siRNA/Zr-FeP MOF的活体成像 |
| 3.3.7 siRNA/Zr-FeP MOF的活体治疗效果研究 |
| 3.4 结论 |
| 4 金属-有机框架纳米片作为超氧自由基产生器用于光声成像指导的乏氧条件下的光动力治疗 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 材料与试剂 |
| 4.2.2 实验用主要仪器设备 |
| 4.2.3 对苯甲酸菌绿素(H_2BBC)的制备 |
| 4.2.4 DBBC-UiO MOF的制备 |
| 4.2.5 DBBC-UiO MOF的体外ROS检测 |
| 4.2.6 细胞培养 |
| 4.2.7 DBBC-UiO MOF的细胞内ROS检测 |
| 4.2.8 材料的细胞毒性试验 |
| 4.2.9 体外治疗 |
| 4.2.10 建立小鼠模型 |
| 4.2.11 荷瘤小鼠的光声成像(PAI) |
| 4.2.12 活体治疗效果评估 |
| 4.3 结果讨论 |
| 4.3.1 DBBC-UiO MOF的制备与表征 |
| 4.3.2 DBBC-UiO MOF的体外ROS产生能力测试 |
| 4.3.3 DBBC-UiO MOF的细胞摄取性能研究 |
| 4.3.4 DBBC-UiO MOF胞内ROS的生成能力测定 |
| 4.3.5 DBBC-UiO MOF的生物安全性与治疗效率 |
| 4.3.6 DBBC-UiO MOF的体外/内PAI与药代动力学分析 |
| 4.3.7 DBBC-UiO MOF的活体治疗效果评估 |
| 4.4 结论 |
| 5 上转换纳米粒子/金属-有机框架/二氧化钛纳米复合体系用于单一近红外光激发的多模式肿瘤光动力治疗 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 材料与试剂 |
| 5.2.2 实验用主要仪器设备 |
| 5.2.3 UCNPs的制备 |
| 5.2.4 UCNP-MOF (UMOF)异质结纳米粒子的制备 |
| 5.2.5 UMOF-TiO_2纳米复合材料的制备 |
| 5.2.6 UMOF-TiO_2的体外ROS检测 |
| 5.2.7 细胞培养 |
| 5.2.8 UMOF-TiO_2的细胞内ROS检测 |
| 5.2.9 材料的细胞毒性试验 |
| 5.2.10 体外治疗 |
| 5.2.11 建立小鼠模型 |
| 5.2.12 活体治疗效果评估 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 UMOF-TiO_2纳米复合体系的制备与表征 |
| 5.3.2 UMOF-TiO_2的体外ROS产生能力测试 |
| 5.3.3 UMOF-TiO_2胞内ROS生成能力测定与治疗效率研究 |
| 5.3.4 UMOF-TiO_2的活体治疗效果评估 |
| 5.3.5 UMOF-TiO_2的潜在体内生物安全性研究 |
| 5.4 结论 |
| 6 乏氧响应的铜-金属有机框架(Cu-MOF)用于肿瘤的高效治疗及活体内microRNA成像检测 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 实验部分 |
| 6.2.1 材料与试剂 |
| 6.2.2 实验用主要仪器设备 |
| 6.2.3 Cu-MOFs的制备 |
| 6.2.4 Cu-MOF/Ce6纳米体系的组装 |
| 6.2.5 Cu-MOF/Ce6的体外降解行为研究(D-Cu-MOF/Ce6) |
| 6.2.6 亚甲基蓝(MB)的体外降解研究 |
| 6.2.7 Cu-MOF/Ce6的~1O_2生成能力测定 |
| 6.2.8 细胞培养 |
| 6.2.9 材料的细胞毒性试验 |
| 6.2.10 细胞内miRNA的成像检测 |
| 6.2.11 体外CDT/SDT治疗 |
| 6.2.12 小鼠模型的建立 |
| 6.2.13 荷瘤小鼠的miRNA活体成像检测 |
| 6.2.14 荷瘤小鼠的光声成像(PAI) |
| 6.2.15 Cu-MOF/Ce6在体内代谢和生物分布研究 |
| 6.2.16 活体治疗效果评估 |
| 6.3 结果讨论 |
| 6.3.1 Cu-MOFs/Ce6的组装与表征 |
| 6.3.2 Cu-MOF/Ce6的体外ROS产生能力测试 |
| 6.3.3 Cu-MOF@DP胞内miRNA的成像检测 |
| 6.3.4 Cu-MOF/Ce6胞内ROS的生成能力测定 |
| 6.3.5 Cu-MOF/Ce6治疗效率的研究 |
| 6.3.6 Cu-MOF@DP的活体miRNA成像检测 |
| 6.3.7 Cu-MOF/Ce6的活体PAI与药代动力学分析 |
| 6.3.8 Cu-MOF/Ce6的活体治疗效果评估 |
| 6.4 结论 |
| 7 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简历及在学研究成果 |
| 学位论文数据集 |
（4）百秋李醇治疗高血压性肾损害作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 引言 |
| 第一部分 PA对SHR血压的作用研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 分组及给药 |
| 2.2 主要溶液的配制 |
| 2.3 一般情况和体重观察 |
| 2.4 大鼠无创尾动脉血压测量 |
| 2.5 血浆肾素、AngⅡ、TGF-β_1、PAI-1含量测定 |
| 2.6 肾组织肾素、AngⅡ、TGF-β_1、PAI-1含量测定 |
| 2.7 统计分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 PA对SHR一般情况和体重的影响 |
| 3.2 PA对SHRSBP的影响 |
| 3.3 PA对SHR血浆肾素、AngⅡ、TGF-β_1和PAI-1含量的影响 |
| 3.4 PA对SHR肾组织肾素、AngⅡ、TGF-β_1和PAI-1含量的影响 |
| 4 小结 |
| 4.1 SHR一般情况的观察结果 |
| 4.2 SHR体重增长率的监测结果 |
| 4.3 SHRSBP的监测结果 |
| 4.4 SHR血浆肾素、AngⅡ、TGF-β_1和PAI-1的检测结果 |
| 4.5 SHR肾组织肾素、AngⅡ、TGF-β_1和PAI-1的检测结果 |
| 第二部分 PA对SHR肾纤维化的作用研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 分组及给药 |
| 2.2 主要溶液的配制 |
| 2.3 肾脏质量指数 |
| 2.4 血浆Cr和BUN含量测定 |
| 2.5 肾组织形态学观察 |
| 2.6 免疫组化检测肾组织ColⅠ、ColⅢ、FN表达 |
| 2.7 RT-PCR检测肾组织α-SMA、MMP-9、TIMP-1、ras、raf-1、ERK_(1/2)mRNA表达 |
| 2.8 Westernblot检测肾组织α-SMA、ras、raf-1、ERK_(1/2)、pERK_(1/2)蛋白表达 |
| 2.9 统计分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 PA对SHR肾重量指数的影响 |
| 3.2 PA对SHR血浆Cr和BUN的影响 |
| 3.3 PA对SHR肾脏组织病理学的影响 |
| 3.4 PA对SHR肾组织ColⅠ、ColⅢ及FN表达的影响 |
| 3.5 PA对SHR肾组织α-SMAmRNA及蛋白表达的影响 |
| 3.6 PA对SHR肾组织MMP-9和TIMP-1mRNA表达的影响 |
| 3.7 PA对SHRras/raf-1/ERK_(1/2)信号通路的影响 |
| 4 小结 |
| 4.1 SHR肾脏质量指数的测量结果 |
| 4.2 SHR血浆Cr和BUN的检测结果 |
| 4.3 SHR肾组织病理学和纤维化的检测结果 |
| 4.4 SHR肾组织ColⅠ、ColⅢ及FN表达的检测结果 |
| 4.5 SHR肾组织α-SMAmRNA和蛋白表达的检测结果 |
| 4.6 SHR肾组织MMP-9和TIMP-1mRNA表达的检测结果 |
| 4.7 SHRras/raf-1/ERK_(1/2)相关mRNA和蛋白表达的检测结果 |
| 第三部分 PA对SHR肠道菌群的作用研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 分组及给药 |
| 2.2 主要溶液的配制 |
| 2.3 血浆SCFAs含量测定 |
| 2.4 16 SrRNA高通量测序检测SHR肠道菌群 |
| 2.5 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 PA对SHR肠道菌群丰度、多样性的影响 |
| 3.2 PA对SHR肠道菌群结构的影响 |
| 3.3 PA对SHR血浆SCFAs的影响 |
| 4 小结 |
| 4.1 SHR肠道菌群丰度、多样性的检测结果 |
| 4.2 SHR肠道菌群结构的检测结果 |
| 4.3 SHR血浆SCFAs的检测结果 |
| 讨论 |
| 1 高血压性肾损害模型的探讨 |
| 1.1 常见的高血压性肾损害大鼠动物模型 |
| 1.2 SHR的选择 |
| 2 溶剂和对照药物的选择 |
| 2.1 特级初榨橄榄油的选用 |
| 2.2 阳性药物卡托普利的选用 |
| 3 PA通过调节血浆和肾组织肾素、AngⅡ、TGF-β_1和PAI-1水平降低血压和抑制肾纤维化 |
| 4 PA抑制肾纤维化机制研究 |
| 4.1 PA抑制MFB的增殖和活化 |
| 4.2 PA减少ECM合成 |
| 4.3 PA促进ECM降解 |
| 4.4 PA调控ras/raf-1/ERK_(1/2)信号通路 |
| 5 PA对肾功能的影响 |
| 6 PA对SHR肠道菌群的调节作用 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果(示例) |
（5）纳米介孔硅及聚合物胶束智能药物递送系统制备与抗肿瘤效应研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 绪论 |
| 1.1 问题的提出及研究意义 |
| 1.1.1 介孔硅纳米颗粒在生物医学领域的研究现状 |
| 1.1.2 聚合物胶束在生物医学领域的研究现状 |
| 1.2 介孔硅纳米颗粒及聚合物胶束在智能药物递送系统的应用 |
| 1.2.1 介孔硅纳米颗粒在智能药物递送系统的应用 |
| 1.2.2 聚合物胶束在智能药物递送系统中的应用 |
| 1.2.3 介孔硅纳米颗粒/聚合物胶束在智能药物递送系统中存在的问题 |
| 1.3 研究的思路及主要研究内容 |
| 1.3.1 研究思路 |
| 1.3.2 主要研究内容 |
| 1.4 本文的创新点 |
| 2 还原响应性介孔硅/肝素药物递送系统构建及抗肝肿瘤评价 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 实验材料与仪器 |
| 2.2.2 还原响应性介孔硅/肝素靶向药物递送系统的构建 |
| 2.2.3 还原响应性介孔硅/肝素靶向药物递送系统的表征 |
| 2.2.4 还原响应性介孔硅/肝素靶向药物递送系统的细胞相容性评价 |
| 2.2.5 还原响应性介孔硅/肝素靶向药物递送系统的体内抗肿瘤评价 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 还原响应性介孔硅/肝素靶向药物递送系统的制备和表征 |
| 2.3.2 还原响应性介孔硅/肝素靶向药物递送系统的控释特性 |
| 2.3.3 还原响应性介孔硅/肝素靶向药物递送系统的细胞评价 |
| 2.3.4 还原响应性介孔硅/肝素靶向药物递送系统的体内抗肿瘤评价 |
| 2.4 小结 |
| 3 pH响应性枝状介孔硅药物递送系统构建及抗肝肿瘤、生物成像评价 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 实验材料与仪器 |
| 3.2.2 pH响应性枝状介孔硅靶向药物递送系统的构建 |
| 3.2.3 pH响应性枝状介孔硅靶向药物递送系统的表征 |
| 3.2.4 pH响应性枝状介孔硅靶向药物递送系统的细胞评价 |
| 3.2.5 pH响应性枝状介孔硅靶向药物递送系统的体内抗肿瘤评价 |
| 3.2.6 pH响应性枝状介孔硅靶向药物递送系统的活体荧光成像评价 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 pH响应性枝状介孔硅靶向药物递送系统的制备和表征 |
| 3.3.2 pH响应性枝状介孔硅靶向药物递送系统的控释特性 |
| 3.3.3 pH响应性枝状介孔硅靶向药物递送系统的细胞评价 |
| 3.3.4 pH响应性枝状介孔硅靶向药物递送系统的体内抗肿瘤评价 |
| 3.3.5 pH响应性枝状介孔硅靶向药物递送系统的体内生物成像评价 |
| 3.4 小结 |
| 4 pH响应性中空介孔硅/透明质酸药物递送系统构建及抗肝肿瘤评价 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 实验材料与仪器 |
| 4.2.2 pH响应性中空介孔硅/透明质酸靶向药物递送系统的构建 |
| 4.2.3 pH响应性中空介孔硅/透明质酸靶向药物递送系统的表征 |
| 4.2.4 pH响应性中空介孔硅/透明质酸靶向药物递送系统的细胞评价 |
| 4.2.5 pH响应性中空介孔硅/透明质酸靶向药物递送系统的体内抗肿瘤评价 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 pH响应性中空介孔硅/透明质酸靶向药物递送系统的制备和表征 |
| 4.3.2 pH响应性中空介孔硅/透明质酸靶向药物递送系统的控释特性 |
| 4.3.3 pH响应性中空介孔硅/透明质酸靶向药物递送系统的细胞评价 |
| 4.3.4 pH响应性中空介孔硅/透明质酸靶向药物递送系统的体内抗肿瘤评价 |
| 4.4 小结 |
| 5 ROS响应性聚合物胶束药物递送系统的构建及在光动力-化药联合治疗肝肿瘤中的应用 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 实验材料与仪器 |
| 5.2.2 ROS响应性聚合物胶束靶向药物递送系统的构建 |
| 5.2.3 ROS响应性聚合物胶束靶向药物递送系统的表征 |
| 5.2.4 ROS响应性聚合物胶束靶向药物递送系统的细胞评价 |
| 5.2.5 ROS响应性聚合物胶束靶向药物递送系统的体内抗肿瘤评价 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 ROS响应性聚合物胶束靶向药物递送系统的制备和表征 |
| 5.3.2 ROS响应性聚合物胶束系统的降解,ROS产生效率及控释特性 |
| 5.3.3 ROS响应性聚合物胶束靶向药物递送系统的细胞评价 |
| 5.3.4 ROS响应性聚合物胶束靶向药物递送系统的体内抗肿瘤评价 |
| 5.4 小结 |
| 6 双靶向级联响应性前药胶束药物递送系统的构建及在光动力-化药联合治疗宫颈癌中的应用 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 实验部分 |
| 6.2.1 实验材料与仪器 |
| 6.2.2 双靶向级联响应性前药胶束药物递送系统的构建 |
| 6.2.3 双靶向级联响应性前药胶束药物递送系统的表征 |
| 6.2.4 双靶向级联响应性前药胶束药物递送系统的细胞评价 |
| 6.2.5 双靶向级联响应性前药胶束药物递送系统的体内抗肿瘤评价 |
| 6.3 结果与讨论 |
| 6.3.1 双靶向级联响应性前药胶束药物递送系统的制备和表征 |
| 6.3.2 双靶向级联响应性前药胶束系统降解、ROS产生及控释特性 |
| 6.3.3 双靶向级联响应性前药胶束药物递送系统的细胞评价 |
| 6.3.4 双靶向级联响应性前药胶束药物递送系统体内抗肿瘤评价 |
| 6.4 小结 |
| 7 pH响应性尺寸/电荷可调胶束的构建及在光动力-PD-L1免疫联合治疗黑色素瘤中的应用 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 实验部分 |
| 7.2.1 实验材料与仪器 |
| 7.2.2 pH响应性尺寸/电荷可调复合胶束的构建 |
| 7.2.3 pH响应性尺寸/电荷可调复合胶束的表征 |
| 7.2.4 pH响应性尺寸/电荷可调复合胶束的细胞评价 |
| 7.2.5 pH响应性尺寸/电荷可调复合胶束的体内抗肿瘤评价 |
| 7.3 结果与讨论 |
| 7.3.1 pH响应性尺寸/电荷可调复合胶束的制备和表征 |
| 7.3.2 pH响应性复合胶束的尺寸减小、正电荷增加、可降解性能、控释特性及ROS产生效率 |
| 7.3.3 pH响应性尺寸/电荷可调复合胶束的细胞评价 |
| 7.3.4 pH响应性尺寸/电荷可调复合胶束的体内抗肿瘤评价 |
| 7.4 小结 |
| 8 主要结论和后续建议 |
| 8.1 主要结论 |
| 8.2 后续工作建议 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| A 作者在攻读学位期间发表的论文目录 |
| B 作者攻读学位期间参加的科研项目 |
（6）糖原检测方法研究进展（论文提纲范文）
| 前言 |
| 1 糖原检测前处理 |
| 1.1 微波法 |
| 1.2 液氮法 |
| 2 定性分析方法 |
| 2.1 PAS染色方法 |
| 2.2 电镜法 |
| 3 定量分析方法 |
| 3.1 蒽酮法 |
| 3.2 试剂盒法 |
| 3.3 荧光测定法 |
| 3.3.1 荧光间接测定法 |
| 3.3.2 2-NBDG荧光直接测定法 |
| 3.4 免疫组化法 |
| 4 糖原检测方法的比较 |
| 5 小结与展望 |
（7）900MHz电磁辐照对大鼠脑损伤及神经行为学改变研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| Abstract |
| 摘要 |
| 1. 前言 |
| 2. 材料与方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 手机电磁辐照对大鼠血脑屏障通透性的影响研究 |
| 参考文献 |
| 研究期间发表的成果 |
| 致谢 |
（8）HCN4在微波辐射致大鼠窦房结损伤中的作用研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 正常成年大鼠 SAN 的解剖学定位和形态学观察 |
| 第一节 正常成年大鼠 SAN 的解剖学定位和组织结构观察 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二节 正常成年大鼠 SAN 的超微结构观察 |
| 实验动物 |
| 实验设备与试剂 |
| 观测指标与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 微波辐射对大鼠 SAN 功能和结构的影响研究 |
| 第一节 微波辐射对大鼠 SAN 功能的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二节 微波辐射后大鼠 SAN 形态结构的损伤特点及量效关系 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第三部分 微波辐射后大鼠 SAN 组织 HCN4 改变及其调控机制研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第四部分 微波辐射对原代培养乳鼠 SAN 细胞的损伤效应及机制研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 攻读博士学位期间发表论文、承担课题、申请专利和获得奖励一览表 |
| 致谢 |
（9）鸡法氏囊发育形态学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 1 前言 |
| 1.1 立题背景 |
| 1.2 文献综述 |
| 1.2.1 法氏囊的发现、位置和形态结构 |
| 1.2.2 法氏囊的功能 |
| 1.2.3 法氏囊的发育变化规律 |
| 1.3 多糖物质及肥大细胞的研究现状 |
| 1.4 TLR4研究现状 |
| 1.5 本文研究的目的意义 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要仪器设备 |
| 2.1.3 主要药品与试剂 |
| 2.1.4 主要试剂与染液配制 |
| 2.1.5 载玻片处理方法 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 采集样品 |
| 2.2.2 制作石蜡切片 |
| 2.2.3 HE染色 |
| 2.2.4 PAS染色 |
| 2.2.5 甲苯胺蓝染色 |
| 2.2.6 免疫组织化学染色 |
| 2.2.7 切片定性及定量分析 |
| 2.2.8 数据统计分析 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 不同日龄鸡法氏囊组织结构变化规律 |
| 3.2 不同日龄鸡法氏囊多糖物质变化规律 |
| 3.3 不同日龄鸡法氏囊肥大细胞变化规律 |
| 3.4 不同日龄鸡法氏囊TLR4变化规律 |
| 4 讨论 |
| 4.1 增龄对鸡法氏囊结构的影响 |
| 4.2 增龄对鸡法氏囊多糖物质的影响 |
| 4.3 增龄对鸡法氏囊肥大细胞的影响 |
| 4.4 TLR4随鸡法氏囊增龄性变化规律 |
| 4.4.1 TLR4在鸡法氏囊内的分布特点 |
| 4.4.2 TLR4在鸡法氏囊的增龄性变化规律 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（10）微波辐射PAS染色显示声带鳞状细胞癌早期的基底膜改变（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 病例选择 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 试剂配制 |
| 1.2.2 制片 |
| 1.2.3 微波辐射PAS染色 |
| 1.2.4 传统PAS染色 |
| 1.2.5 免疫组化染色 |
| 1.3 结果判定 |
| 1.4 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
四、微波辐射在PAS组化染色中的应用（论文参考文献）
- [1]肺癌的氟-19磁共振/荧光/光声多模态影像研究[D]. 李莎. 中国科学院大学(中国科学院精密测量科学与技术创新研究院), 2020(01)
- [2]粒毛盘菌多糖抗肿瘤作用及其机制研究[D]. 宗帅. 合肥工业大学, 2020(01)
- [3]功能化金属有机框架纳米材料在肿瘤诊疗中的应用[D]. 张凯. 北京科技大学, 2020(06)
- [4]百秋李醇治疗高血压性肾损害作用机制研究[D]. 胡冠英. 成都中医药大学, 2018(01)
- [5]纳米介孔硅及聚合物胶束智能药物递送系统制备与抗肿瘤效应研究[D]. 戴亮亮. 重庆大学, 2018(04)
- [6]糖原检测方法研究进展[J]. 杨柳,郭海云,邵长健,朱凯龙,张伟东,才延辉,李燕. 现代生物医学进展, 2018(01)
- [7]900MHz电磁辐照对大鼠脑损伤及神经行为学改变研究[D]. 张渊. 第三军医大学, 2014(01)
- [8]HCN4在微波辐射致大鼠窦房结损伤中的作用研究[D]. 刘燕青. 中国人民解放军军事医学科学院, 2013(11)
- [9]鸡法氏囊发育形态学研究[D]. 侯勇. 华中农业大学, 2013(02)
- [10]微波辐射PAS染色显示声带鳞状细胞癌早期的基底膜改变[J]. 田澄,金玉兰,赵晓丽,刘红刚. 诊断病理学杂志, 2011(06)